鼠抗人Bcl-X單克隆抗體注意事項
注意事項:
1.,重複冷凍/融化循環可使抗體(ti) 變性,導致其形成使抗體(ti) 結合能力降低的聚集物。保存於(yu) -20二對於(yu) 大多數抗體(ti) 是適當的;保存於(yu) -80七無明
顯優(you) 勢。冰箱不能為(wei) 無霜型。這些冷凍和融化之間的循環(以減少結霜)恰恰是應該避免的。
2.抗體(ti) 試劑瓶應盈於(yu) 具有最小溫度波動的冰箱區域.例如朝冰箱後部放置而不是圈於(yu) 門架上。有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到50%
的終濃度以防止冷凍/融化損傷(shang) ;甘油可將凝固點降低至低於(yu) -20仁。雖然這對於(yu) 很多抗體(ti) 是可接受的,但是隻有一小部分我們(men) 提供的抗體(ti)
測試了在該保存條件下的穩定性,並且我們(men) 的保證僅(jin) 使用於(yu) 按數據表上推薦的方式保存的抗體(ti) 。不建議將包含甘油的溶液保存於(yu) -80七,因
為(wei) 該溫度低於(yu) 甘油的凝固點。請注意甘油可被細菌汙染,如果加入甘油或任何冷凍保護劑,,則應當小心操作,以得到無菌製備物。
3.應避免抗體(ti) 在稀釋至工作濃度後在4七下保存超過一天。蛋白質在高濃度下保存時一般不易降解,理想的濃度為(wei) 1mg/m/或更高。這是在
抗休溶液中加入蛋白質例如BSA作為(wei) 穩定劑的理論基礎。加入的蛋白質也有助於(yu) 減少抗體(ti) 因結合於(yu) 容器壁上而造成的損失。對於(yu) 打算進
行偶聯的抗體(ti) 而言,由於(yu) 穩定蛋白質會(hui) 與(yu) 抗體(ti) 競爭(zheng) ,降低了偶聯的效率,所以不應加入穩定蛋白質。
應注意的問題:
1、包被抗體(ti) 或抗原不適,易產(chan) 生陽性值較小,或產(chan) 生變異,即跳管現象。
2、用抗血清不純化,或純化程度太低的抗體(ti) 包被,則陽性值較小,或沒有陽性梯度。
3、封閉不好或標記物過濃可產(chan) 生對照較高。