胱抑素C星空体育官网中国使用時注意事項都有哪些?
點擊次數:1102 更新時間:2022-08-23
胱抑素C是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質,是一種半胱氨*蛋白酶抑製劑。編碼基因屬於(yu) 管家基因,能在所有的有核細胞內(nei) 以恒定速度持續轉錄與(yu) 表達,無組織特異性。其分子量小(13KD),生理條件下帶正電荷,能自由從(cong) 腎小球濾過,*被腎小管上皮細胞重吸收並於(yu) 細胞內(nei) 降解,不重新回到血液中;同時腎小管上皮細胞也不分泌胱抑素C至管腔內(nei) 。
胱抑素C星空体育官网中国檢測原理:
采用雙抗體(ti) 夾心ELISA法。用抗體(ti) 包被於(yu) 酶標板上,實驗時樣品或標準品中的抗原會(hui) 與(yu) 包被抗體(ti) 結合,遊離的成分被洗去。依次加入生物*化的抗體(ti) 和辣根過氧化物酶標記的親(qin) 和素。抗體(ti) 與(yu) 結合在包被抗體(ti) 上的抗原結合、生物*與(yu) 親(qin) 和素特異性結合而形成免疫複合物,遊離的成分被洗去。加入顯色底物,胱抑素C星空体育官网中国在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液後變成黃色。用酶標儀(yi) 在450nm波長處測OD值,抗原濃度與(yu) OD450值之間呈正比,通過繪製標準曲線計算出樣品中指標的濃度。
胱抑素C星空体育官网中国使用注意事項:
標本宜在新鮮時檢測,如有細菌汙染,菌體(ti) 中可能含有內(nei) 源性HRP,也會(hui) 產(chan) 生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
凍結標本溶解後,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
渾濁或有沉澱的標本應先離心或過濾,澄清後再檢測。
反複凍融會(hui) 使蛋白效價(jia) 降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
ELISA實驗標準曲線平直,一般有以下原因:標準曲線製備是否不當,洗孔不淨,吸孔不充分,讀數不準確或是吸量誤差。查找原因,即可找到相應解決(jue) 方案。
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