D2D Elisa 試劑盒工藝使用流程是你想的哪樣嗎？
點擊次數：1076 更新時間：2022-09-21
D2D Elisa 試劑盒的樣品收集、處理及保存方法應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本水平。用純化抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入抗體(ti) ，再與(yu) HRP標記的抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在對應波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品濃度。
D2D Elisa 試劑盒工藝使用流程：
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照規定在小試管中進行稀釋。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為(wei) 5倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30後棄去，如此重複5次，拍幹。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 再次溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
8. 再次洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30後棄去，如此重複5次，拍幹。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行。
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