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阿留申病病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提

點擊次數:815 更新時間:2022-09-27

樣品RNA的抽提:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鍾使其*溶解。

②兩(liang) 相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體(ti) 15秒後,15到30℃孵育2到3分鍾。4℃下12000rpm離心15分鍾。離心後混合液體(ti) 將分為(wei) 下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配於(yu) 水相中。水相上層的體(ti) 積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉澱 將水相上層轉移到一幹淨無RNA酶的離心管中。加等體(ti) 積異丙醇混合以沉澱其中的RNA,混勻後15到30℃孵育10分鍾後,於(yu) 4℃下12000rpm 離心10分鍾。此時離心前不可見的RNA沉澱將在管底部和側(ce) 壁上形成膠狀沉澱塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配製),清洗RNA沉澱。混勻後,4℃下7000rpm離心5分鍾。

⑤RNA幹燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉澱在室溫空氣中幹燥5-10分鍾。

⑥溶解RNA沉澱 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反複吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存於(yu) -80℃待用。

2 RNA質量檢測

1)紫外吸收法測定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然後取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)後,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

① 濃度測定

A260下讀值為(wei) 1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為(wei) :A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

alpha 1 Fetoprotein甲胎蛋白抗體(ti)

ATM毛細血管擴張性共濟失調症突變蛋白抗體(ti)

ABCF2ATP結合盒轉運蛋白2抗體(ti)

ABLIM3肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3抗體(ti)

Acidic Calponin酸性鈣調蛋白3抗體(ti)

phospho-ADAM17 (Thr735)磷酸化CD156b抗體(ti)

ADH5乙醇脫氫酶5抗體(ti)

ADH6乙醇脫氫酶6抗體(ti)

AGPAT5溶血磷脂酰基轉移酶5抗體(ti)

AIPL1遺傳(chuan) 性失明相關(guan) 蛋白AIPL1抗體(ti)

AIRE免疫調節蛋白AIRE抗體(ti)

phospho-AKT1 (Ser473)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體(ti)

phospho-AKT1 (Thr72)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體(ti)

phospho-AKT1 (Tyr326)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體(ti)

ALDH1A2乙醛脫氫酶2型抗體(ti)

ALDH9A1γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體(ti)

AGPS衰老相關(guan) 蛋白5抗體(ti)

phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體(ti) 蛋白質/α-晶體(ti) 蛋白b鏈抗體(ti)

AMBN釉基質蛋白抗體(ti)

phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體(ti)

phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體(ti)

phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受體(ti) 抗體(ti)

phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受體(ti) 抗體(ti)

phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受體(ti) 抗體(ti)


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