人皮膚反應因子/炎性因子elisa檢測試劑盒使用方法：

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加於(yu) 酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為(wei) 保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體(ti) ，甩幹，每個(ge) 孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鍾內(nei) 配製)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。

3.棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板 3次，每次浸泡1-2分鍾，大約350μl /每孔，甩幹並在吸水紙上輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨(lin) 用前15分鍾內(nei) 配製)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

5.棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鍾左右(根據實際顯況酌情縮短或延長，但不可超過30分鍾。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀(yi) 在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀(yi) 電源，預熱儀(yi) 器，設置好檢測程序。

9.實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。