calnexin elisa試劑盒樣品收集、處理及保存
樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yang) 上清:適用於(yu) 檢測體(ti) 外培養(yang) 的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鍾,收集上清。
2)細胞:用PBS反複洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反複凍融,使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鍾,取上清待測。
4)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為(wei) 抗凝劑,混合後靜置10-20 分鍾後,以1000×g離心15分鍾,收集上清。
5)體(ti) 液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nei) 毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鍾,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀(yi) 將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鍾,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反複冷凍。保存過程中如出現沉澱,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。