收到人腦多型膠質母細胞瘤細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yang) 瓶是否完好,培養(yang) 液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,並及時與(yu) 技(所拍照片將作為(wei) 後續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yang) 瓶表麵,顯微鏡下觀察狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會(hui) 有少量從(cong) 瓶壁脫落;先不要打開培養(yang) 瓶蓋,將細胞置於(yu) 細胞培養(yang) 箱內(nei) 靜置培養(yang) 2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書(shu) ,了解細胞相關(guan) 信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養(yang) 基、血清比例、所需細胞因子、傳(chuan) 代比例、換液頻率等。
4、靜置完成後,取出細胞培養(yang) 瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為(wei) 後續服務依據);建議細胞傳(chuan) 代培養(yang) 後,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳(chuan) 代;若未超過80%,移除細胞培養(yang) 瓶內(nei) 培養(yang) 基,預留5ml左右繼續培養(yang) ,直至細胞密度達80%左右再進行傳(chuan) 代操作,瓶蓋可稍微擰鬆。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yang) 瓶內(nei) 液體(ti) 全部轉移至50ml無菌離心管內(nei) ,1200rpm離心5min,離心後上清培養(yang) 基可收集備用,管底細胞沉澱加入5ml培養(yang) 基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個(ge) 細胞培養(yang) 瓶內(nei) 培養(yang) ,補加培養(yang) 基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養(yang) ,直至細胞密度達80%左右時再進行傳(chuan) 代操作。