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細胞的十個訣竅

點擊次數:1183 更新時間:2016-03-11

    可是許多生物學實驗的主角。如果細胞長不好,那麽(me) 實驗的結果也不會(hui) 好到哪兒(er) 去。在此我公司技術人員介紹了讓細胞快樂(le) 的十個(ge) 訣竅。細胞可是許多生物學實驗的主角。在此介紹了讓細胞快樂(le) 的十個(ge) 訣竅。

    1. 確保所有實驗室材料都無菌 交叉汙染是細胞培養(yang) 的大敵。即使是zui輕微的汙染,也可能毀了幾個(ge) 星期的成果。因培養(yang) 箱內(nei) 溫暖潮濕,真菌極易生長,因此必須注意定期清潔。此外,在將培養(yang) 瓶、移液管及其他的相關(guan) 物品放入超淨台之前,應用酒精擦拭幹淨,以避免汙染。

    2. 小心處理您的培養(yang) 物 細胞培養(yang) 的脆弱性怎麽(me) 強調也不為(wei) 過。劇烈搖晃,或連續的溫度波動可能會(hui) 對生長產(chan) 生不利的影響。確保培養(yang) 箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀(yi) 器。此外,盡量避免一次處理多個(ge) 細胞係,因為(wei) 它可能會(hui) 影響細胞的基因型和表型。您還應定期完成STR圖譜分析,以確認細胞係的身份。

    3. 在使用前正確解凍細胞 盡管解凍看起來是個(ge) 簡單的步驟,但必須操作得當,以免傷(shang) 害細胞。長時間暴露在高溫條件下會(hui) 使細胞無法鋪板。因此,凍存管應當在37°C水浴中放置2分鍾,然後用條件培養(yang) 基稀釋,以避免DMSO造成直接傷(shang) 害。

    4. 使用對數生的細胞 細胞培養(yang) 過程共有3個(ge) 階段:停滯期、對數期和平台期,分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。zui有活力的細胞是健康的,快速分裂的,在對數期以70-80%的匯合度存在。

    5. 在傳(chuan) 代之前不要讓細胞*匯合 匯合度是指貼壁細胞占據培養(yang) 瓶表麵積的比例。*匯合意味著100%的表麵都被貼壁細胞覆蓋。一定要避免這種狀態,因為(wei) 它意味著細胞不能繼續生長。不過,當務之急是使用活躍生長的細胞。

    6. 選擇的培養(yang) 基開發策略 在細胞培養(yang) 過程中,培養(yang) 基是控製產(chan) 品質量、產(chan) 量和成本的zui重要因素。必須針對每種培養(yang) 物來定製培養(yang) 基,以優(you) 化實驗結果。在決(jue) 定以哪種方式來開發您的培養(yang) 基時,您有幾個(ge) 選擇。您可以購買(mai) 現成的,自己開發,也可以與(yu) 另一家公司合作開發特定的培養(yang) 基。在這個(ge) 過程中,您需要考慮時間和成本等因素。

    7. 配製幹粉培養(yang) 基時評估水的質量 液體(ti) 培養(yang) 基往往會(hui) 帶來比幹粉培養(yang) 基更高質量的結果。這可能與(yu) 水的質量有關(guan) 。由於(yu) 細菌在水中迅速生長,故需要監控內(nei) 毒素及其他汙染物。商業(ye) 公司有資源來監控和控製細菌生長,比如過濾器。因此使用商業(ye) 化的液體(ti) 培養(yang) 基會(hui) 更加可靠一點。

    8. 利用細胞的代謝特性來優(you) 化培養(yang) 基 分析使用過的培養(yang) 基,有助於(yu) 鑒定必要成分的代謝速率,包括氨基酸和維生素。從(cong) 細胞生長階段和蛋白階段收集到的動態代謝圖譜可用來平衡基礎培養(yang) 基和添加培養(yang) 基,指導培養(yang) 基的重點,有助於(yu) 蛋白質的。

    9. 避免細胞的過度消化 通過消化負責讓細胞與(yu) 容器結合的蛋白質,而實現貼壁細胞的傳(chuan) 代。如果細胞暴露在中時間太長,則將開始切割細胞表麵蛋白,這會(hui) 影響細胞行駛正常功能的能力。

    10. 培養(yang) 基中不要一直使用抗生素 隨著培養(yang) 物更加頻繁地暴露在抗生素中,對抗生素有著天然耐藥性的菌株將開始出現。

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