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上皮細胞的培養

點擊次數:1621 更新時間:2016-05-23

乳腺組織培養(yang)

直接培養(yang) 法:

  1.在含有少量培養(yang) 液或Hanks液的容器中,用鋒利刀片將組織反複切割成碎塊。

  2.把組織碎塊連同液體(ti) 注入離心管中,再補加少許培養(yang) 液,用吸管吹打片刻, 
置試管架3~5分鍾。吸除上層液可排除非乳腺細胞部分。重複2~3次。

  3.末次處理結束後,向沉降管中再補加培養(yang) 液,用吸管稍吹打,使沉降物重懸。 
不待細胞團塊下降立即通過3~4層無菌紗布濾入另管中。

  4.調整好適宜密度,接種入培養(yang) 瓶中培養(yang) 。

上皮細胞培養(yang)

 

表皮培養(yang)

  1.取材:取外科植皮或手術殘餘(yu) 皮膚小塊,以角化層薄者為(wei) 佳,早產(chan) 流產(chan) 兒(er) 皮 
膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。

  2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鍾。

  3.冷消化:換入0.25%中,置4℃過夜。

  4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與(yu) 層分開。

  5.溫消化:取出表皮單獨處理,用剪刀剪成更小的塊後,置入新的0.25%胰蛋 
白酶中,37℃再消化30~60分鍾。

  6.用吸管輕輕反複吹打,使成細胞懸液。

  7.培養(yang) 液:通過80目不鏽鋼紗網濾過後,低速離心,吸上清,直接加入Eagle 
液和20%小牛血清,製成懸液,接種入碟皿中,CO溫箱培養(yang) 。

 

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