比色前應先用潔淨的吸水紙拭幹板底附著的液體(ti) ，然後將板正確放入酶標比色儀(yi) 的比色架中。以軟板為(wei) 載體(ti) 的試驗，需先將板置於(yu) 標準96孔的座架中，才可進行比色。在加底物液顯色前，先將軟板邊緣剪淨，這樣，此板就可*平妥坐入座架中。比色時應先以蒸餾水校零點，測讀底物孔（未經任何反應僅(jin) 加底物液的孔）和空白孔（以生鹽水或稀釋液代替標本作全過程的孔），以記錄本次試驗的試劑狀況。其後可用空白孔以蒸餾水校零點，以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度，然後進行計算。

  比色結果的表達以往通用光密度（oplical density，OD），現按規定用吸光度（absorbence，A），兩(liang) 者含義(yi) 相同。通常的表示方法是，將吸收波長寫(xie) 於(yu) A字母的右下角，如OPD的吸收波長為(wei) 492nm，表示方法為(wei) "A492nm"或"OD492nm"。