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從哪些方麵來選擇elisa試劑盒呢

點擊次數:1124 更新時間:2016-07-20

四大因素納為(wei) 購買(mai) 星空体育官网中国的選擇條件:
一、檢測方式
如今檢測星空体育官网中国有許多途徑,我們(men) 可以根據自己的偏好進行選擇。一般Elisa檢測的是酶促反應的可溶性產(chan) 物,抗體(ti) 上結合有相應的酶,而反應體(ti) 係中添加有相應的底物。這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈黴親(qin) 和素標記的酶與(yu) 親(qin) 和素標記的一抗結合。此外Elisa結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。
二、實驗類型
雖然有多種類型,不過它們(men) 都有一個(ge) 共同特點,就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體(ti) 進行捕獲。in-cell Elisa和酶聯免疫斑點elispot是兩(liang) 種特殊的類型,in-cell Elisa需要將微孔板中培養(yang) 的細胞進行固定和通透化,然後再用抗體(ti) 原位檢測。elispot有點像蛋白印跡western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yang) 細胞,然後在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們(men) 還需要根據自身需要選擇96孔板或是384孔板進行Elisa實驗。
三、抗體(ti) 類型
單克隆抗體(ti) 和多克隆抗體(ti) 都能夠用於(yu) Elisa檢測,實際上有時候二者結合效果更好。例如,對於(yu) 雙抗夾心法而言,用多抗進行捕獲而單抗進行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨後單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
四、交叉反應
如果抗體(ti) 間發生衝(chong) 突或交叉反應就會(hui) 影響整個(ge) 實驗的特異性。其中抗體(ti) 來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個(ge) 因素。盡管現在購買(mai) 源自動物的抗體(ti) 越來越容易,我們(men) 仍有必要確認一下是否會(hui) 產(chan) 生交叉反應的問題。在用雙抗夾心法進行Elisa檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與(yu) 捕獲抗體(ti) 起反應。如果檢測用二抗與(yu) 捕獲抗體(ti) 結合,實驗特異性就會(hui) 大打折扣。通常我們(men) 選用源自不同宿主的捕獲抗體(ti) 和檢測一抗,來避免上述問題。

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