ELISA試劑盒的檢測根源
ELISA試劑盒的檢測根源
ELISA試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自於(yu) 該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中並孵育,如果其中存在HEV IgM抗體(ti) ,這些抗體(ti) 就會(hui) 與(yu) HEV 的多肽抗原結合,並固定在上麵,洗板除去其它非特異性抗體(ti) 和樣品中的其它成份。然後加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,ELISA試劑盒經第二次孵育後,酶結合物就會(hui) 與(yu) *次孵育結合上的HEV IgM抗體(ti) 相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會(hui) 發生酶-底物反應,隻有那些含有HEV IgM抗體(ti) 和酶結合物所形成的複合物的孔才會(hui) 發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,ELISA試劑盒並在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體(ti) ELISA試劑盒的測試標準, O.D.值大於(yu) 或等於(yu) Cut-Off值的樣品被認為(wei) 是初試陽性。