培養基細胞培養方法
培養(yang) 基細胞培養(yang) 方法
1、從(cong) 手術室無菌取腦髓灰質或白質後,仔細剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置於(yu) 30—50倍體(ti) 積的Hanks液中,此時腦組織比較柔軟,反複吹打即製成細胞懸液。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鍾後,細胞或細胞團快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反複二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎塊並獲較多細胞成分。
4、在沉降物中加入適量培養(yang) 液,通過紗網成紗布過濾,計數並調整細胞密度。
5、接入培養(yang) 基瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養(yang) 。
該細胞適應環境過程較長,培養(yang) 基接種後貼壁較慢。貼壁後短期內(nei) 也可能不見細胞分裂現象,然而一旦生長後即能迅速進入旺盛的增殖狀態。細胞傳(chuan) 代可以0.25%消化處理。