ELISA的原理和類型
1. 的原理
ELISA的基礎是抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體(ti) 或抗原)與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。用洗滌的方法使固相載體(ti) 上形成的抗原抗體(ti) 複合物與(yu) 液體(ti) 中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體(ti) ,也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物,產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於(yu) 酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。
2. ELISA的類型
ELISA可用於(yu) 測定抗原,也可用於(yu) 測定抗體(ti) 。在這種測定方法中有三個(ge) 必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體(ti) ,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體(ti) ,稱為(wei) "結合物"(conjugate);(3)酶反應的底物。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體(ti) 條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。用於(yu) 臨(lin) 床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:
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