巨噬細胞炎性蛋白2星空体育官网中国實驗中操作步驟和結果判斷

操作步驟

1.取出酶標板，設空白孔，依照次序對應分別加入100μl的標準品於(yu) 空白微孔中(空白孔視為(wei) 0號標準品，用醫用蒸餾水替代)

2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品於(yu) 空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

3、將酶標板置於(yu) 37℃溫育30分鍾;

4、將酶標板板取出，將其中的液體(ti) 甩去，每個(ge) 孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體(ti) ;

5、每個(ge) 孔中加滿應用洗滌液後，輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。

6、重複第5個(ge) 步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。

7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

8、將96孔板置於(yu) 37℃溫育30分鍾。

9、將酶標板取出，將其中的液體(ti) 甩去，每個(ge) 孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體(ti) 。

10、每個(ge) 孔中再次加滿洗滌應用液後，室溫輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。

11、重複第5個(ge) 步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。

12、在每個(ge) 孔中加入底物A 50μl後立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)

13、將酶標板置於(yu) 37℃避光溫育反應15分鍾。

14、每個(ge) 微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。

15、在酶標儀(yi) 上，450nm處測定OD; 顯色後，15分鍾內(nei) 進行測定。

16、根據製備的標準曲線計算樣本含量

結果判斷

1. 儀(yi) 器值：於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值;

2、檢測值範圍：0-400pmol/L

3、敏感度：1.0pmol/L