巨噬細胞炎性蛋白2星空体育官网中国樣本要求分析
樣本要求
在收集標本前都必須有一個(ge) 完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們(men) 提倡新鮮標本盡早檢測,對收集後當天就進行檢測的標本,及時儲(chu) 存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材後,將標本及時分裝後放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與(yu) 室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反複凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書(shu) ,具體(ti) 操作注意事項請與(yu) 我司技術人員溝通。
液體(ti) 類標本:標本必須為(wei) 液體(ti) ,不含沉澱。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yang) 上清、組織勻漿等。
血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉澱形成,應再次離心。
血漿:應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為(wei) 抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉澱形成,應再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉澱形成,應再次離心。
細胞培養(yang) 上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nei) 的成份時,用PBS(PH7.0-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wan) /ml左右。通過反複凍融,以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
組織標本:切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,緩衝(chong) 液中可加入1μg/L蛋白酶抑製劑或50U/ml的Aprotinin()。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置於(yu) -20度或-70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮幹燥。分裝後一份待檢測,其餘(yu) 冷凍備用。
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