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人類白細胞抗原C酶聯免疫分析ELISA試劑盒檢測範圍

點擊次數:1033 更新時間:2017-03-23

檢測範圍:
5μg/L -150μg/L
規格:
96人份/盒

人類白細胞抗原C酶聯免疫分析ELISA試劑盒標本要求 

1.標本采集後盡早進行提取,提取按相關(guan) 文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於(yu) -20℃保存,但應避免反複凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與(yu) 加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然後在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然後從(cong) *孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻後從(cong) 第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從(cong) 第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從(cong) 第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋後各孔加樣量都為(wei) 50μl,濃度分別為(wei) 120μg/L,80μg/L ,40μg/L,20μg/L, 10μg/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘(yu) 各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為(wei) 5倍)。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。   
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體(ti) ,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行。
計算
人類白細胞抗原C酶聯免疫分析ELISA試劑盒以標準物的濃度為(wei) 橫坐標,OD值為(wei) 縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為(wei) 樣品的實際濃度。 
人類白細胞抗原C酶聯免疫分析ELISA試劑盒注意事項
1.試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用,酶標包被板開封後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控製在5分鍾內(nei) ,如標本數量多,使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做複孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於(yu) 標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定,計算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜隻限一次性使用,以避免交叉汙染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與(yu) 英文說明書(shu) 有異ELISA試劑盒,以英文說明書(shu) 為(wei) 準。

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