雙抗體(ti) 夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下:

(1)將特異性抗體(ti) 與(yu) 固相載體(ti) 連接，形成固相抗體(ti) :洗滌除去未結合的抗體(ti) 及雜質。

(2)用脫脂奶粉或BSA進行封閉。洗滌除去多餘(yu) 的脫脂奶粉或BSA。

(3)加受檢標本:使之與(yu) 固相抗體(ti) 接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與(yu) 固相載體(ti) 上的抗體(ti) 結合，形成固相抗原複合物。洗滌除去其他未結合的物質。

(4)加酶標抗體(ti) :使固相免疫複合物上的抗原與(yu) 酶標抗體(ti) 結合。*洗滌未結合的酶標抗體(ti) 。此時固相載體(ti) 上帶有的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量正相關(guan) 。

(5)加底物:夾心式複合物中的酶催化底物成為(wei) 有色產(chan) 物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。

根據同樣原理，將大分子抗原分別製備固相抗原和酶標抗原結合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體(ti) 。