洗滌在實驗過程中雖不是一個(ge) 反應步驟，但卻也決(jue) 定著實驗的成敗。ELSIA實驗就是靠洗滌來達到分離遊離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌來清除殘留在板孔中沒能與(yu) 固相抗原或抗體(ti) 結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附於(yu) 固相載體(ti) 的幹擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的幹擾物質洗滌下來。可以說在ELISA實驗操作中，洗滌是zui主要的關(guan) 鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴(yan) 格按要求洗滌，不得馬虎。
   洗滌的方式除某些ELISA實驗儀(yi) 器配有特殊的自動洗滌儀(yi) 外，手工操作分為(wei) 浸泡式和流水衝(chong) 洗式兩(liang) 種，過程如下：
（一）浸泡式
   a.吸幹或甩幹孔內(nei) 反應液；b.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔後，即甩去）；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鍾，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短；d.吸幹孔內(nei) 液體(ti) 。吸幹應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體(ti) 後在清潔毛巾或吸水紙上拍幹；e.重複操作c和d，洗滌3-4次（或按說明規定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數或延長浸泡時間。
   微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為(wei) 含非離子型洗滌劑的中性緩衝(chong) 液。聚苯乙烯載體(ti) 與(yu) 蛋白質的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親(qin) 水基團，其疏水基團與(yu) 蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從(cong) 而削弱蛋白質與(yu) 固相載體(ti) 的結合，並借助於(yu) 親(qin) 水基團和水分子的結合作用，使蛋白質回複到水溶液狀態，從(cong) 而脫離固相載體(ti) 。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高於(yu) 0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體(ti) 解吸附而減低試驗的靈敏度。
（2）流水衝(chong) 洗式
   流水衝(chong) 洗法zui初是做用於(yu) 小珠載體(ti) 的洗滌，洗滌液僅(jin) 為(wei) 蒸餾水，甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置，使小珠在流水衝(chong) 擊下不斷地滾動淋洗，持續衝(chong) 洗2分鍾後，吸幹液體(ti) ，再用蒸餾水浸泡2分鍾，吸幹即可。浸泡式猶如盆浴，流水衝(chong) 洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為(wei) *，且也簡便、快速。已有實驗表明，流水衝(chong) 洗式同樣也適用於(yu) 微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓，讓水流衝(chong) 擊板孔表麵，洗滌效果更佳。