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胱抑素C星空体育官网中国測定的常用模式--固相捕獲法測IgM抗體

點擊次數:2529 更新時間:2018-02-08

在病原體(ti) 急性感染的診斷中,通常需檢測IgM抗體(ti) ,如急性甲型肝炎診斷的血清抗HAVIgM檢測、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBc lgM檢測和TORCH項目的係列IgM檢測等。IgM抗體(ti) 也有使用間接法測定的,如目前在市場上可見到的有些TORCH係列的IgM檢測試劑盒。在使用間接法測IgM抗體(ti) 時,由於(yu) 臨(lin) 床血清樣本中含有高濃度的IgG抗體(ti) ,其中部分特異IgG抗體(ti) 將與(yu) IgM抗體(ti) 競爭(zheng) 與(yu) 固相抗原結合,從(cong) 而幹擾IgM抗體(ti) 的檢測。
 
    因此,在使用間接法測定IgM抗體(ti) 時,通常須將血清樣本用抗人IgG抗體(ti) 或SPA預處理,以去除IgG的幹擾。這樣不但測定較為(wei) 繁瑣,而且影響測定的特異性和靈敏度。目前,常用的IgM抗體(ti) 檢測方法為(wei) 捕獲法,即以抗人IgM抗體(ti) (抗人u鏈)作為(wei) 固相抗體(ti) ,當加入血清標本時,其中的IgM類抗體(ti) (特異的和非特異的)即可被固相抗體(ti) 捕獲,再加入特異抗原,其與(yu) 固相上捕獲的IgM抗體(ti) 結合後,加入酶標抗特異抗原的抗體(ti) ,zui後加入底物顯色。具體(ti) 操作步驟如下:
 
    1.首先將抗人IgMbt鏈抗體(ti) 於(yu) 碳酸鹽緩衝(chong) 液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗體(ti) ,洗滌去除未與(yu) 固相結合或結合不緊的抗體(ti) 後,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結合的部分及雜質。
    2.加入含待測IgM抗體(ti) 的臨(lin) 床樣本如血清等,溫育一定時間後洗板;此時,待測樣本中的IgM抗體(ti) 就會(hui) 與(yu) 固相上的抗P鏈抗體(ti) 反應而吸附於(yu) 固相上。
    3.加入特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等,溫育一定時間後洗板;此時,特異抗原就會(hui) 與(yu) 固相上的特異IgM抗體(ti) 發生反應。
    4.加入酶標記的抗特異抗原的抗體(ti) ,溫育一定時間後洗板;此時,在固相上即形成相應的抗原抗體(ti) 複合物。
    5.加入酶底物,溫育顯色測定。
酵母粉葡萄糖瓊脂    進口、國產(chan)     Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol  Agar    用於(yu) 食品中黴菌及酵母菌總數測定    250
Candida Elective 瓊脂    進口、國產(chan)     Candida Elective Agar to Nickerson    用於(yu) 食品中Candida及酵母菌總數測定(Merck方法)    250
DTM培養(yang) 基    進口、國產(chan)     DTM Medium    用於(yu) 食品中真菌的培養(yang) (Merck方法)    250
DRBC瓊脂    進口、國產(chan)     DRBC Agar    用於(yu) 食品中黴菌及酵母菌分離培養(yang)     250
WORT 瓊脂    進口、國產(chan)     Wort Agar    用於(yu) 真菌,特別是酵母菌的計數和增菌培養(yang) (Merck方法)    250
WORT 肉湯    進口、國產(chan)     Wort Broth    用於(yu) 真菌,特別是酵母菌的培養(yang) (Merck方法)    250
YGC瓊脂    進口、國產(chan)     YGC Agar    用於(yu) 奶和奶製品中黴菌及酵母菌分離培養(yang) (ISO方法)    250
改良綠色酵母菌和真菌肉湯    進口、國產(chan)     m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH    用於(yu) 飲料中真菌及酵母菌檢測(Acumedia方法)    250
Littman 瓊脂    進口、國產(chan)     Littman Agar    用於(yu) 真菌的分離培養(yang) (Acumedia方法)    250
DG-18瓊脂    進口、國產(chan)     DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR     用於(yu) 食品中黴菌和酵母菌分離培養(yang) (Acumedia方法)    250

 

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