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胱抑素C星空体育官网中国標本的采取和保存

點擊次數:805 更新時間:2018-04-23

的試劑,良好的儀(yi) 器和正確的操作是保證胱抑素C星空体育官网中国檢測結果準確可靠的必要條件。
胱抑素C星空体育官网中国的操作因固相載體(ti) 的形成不同而有所差異,國內(nei) 醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個(ge) 操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與(yu) 特殊儀(yi) 器配合應用,兩(liang) 者均有詳細的使用說明,嚴(yan) 格遵照規定操作,必能得出準確的結果。
1、胱抑素C星空体育官网中国標本的采取和保存
可用作胱抑素C星空体育官网中国測定的標本十分廣泛,體(ti) 液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體(ti) 或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為(wei) 標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等於(yu) 血清。製備血漿標本需借助於(yu) 抗凝劑,而血清標本隻要待血清自然凝固、血塊收縮後即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為(wei) 檢測標本。在胱抑素C星空体育官网中国中血漿和血清可同等應用。
胱抑素C星空体育官网中国血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會(hui) 釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為(wei) 標記的ELISA測定中,溶血標本可能會(hui) 增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌汙染,菌體(ti) 中可能含有內(nei) 源性HRP,也會(hui) 產(chan) 生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
一般說來,在5天內(nei) 測定的血清標本可放置於(yu) 4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解後,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉澱的血清標本應先離心或過濾,澄清後再檢測。反複凍融會(hui) 使抗體(ti) 效價(jia) 跌落,所以測抗體(ti) 的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。
2、胱抑素C星空体育官网中国試劑的準備
按試劑盒說明書(shu) 的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用於(yu) 洗滌的,應為(wei) 新鮮的和高質量的。自配的緩衝(chong) 液應用pH計測量較正。從(cong) 冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與(yu) 室溫平衡後使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
3、胱抑素C星空体育官网中国加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,並注意不可濺出,不可產(chan) 生氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發生交叉汙染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規定的稀釋度稀釋後再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然後在微型震蕩器上震蕩1分鍾以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
4、胱抑素C星空体育官网中国保溫
在胱抑素C星空体育官网中国中一般有兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應,即加標本和加酶結合物後。抗原抗體(ti) 反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為(wei) 溫育(incubation),有人稱之為(wei) 孵育,在胱抑素C星空体育官网中国中似不恰當。  上一篇 胱抑素C星空体育官网中国計算和結果判定 下一篇 白介素1β星空体育官网中国在技能上缺乏標準化

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