在的實際應用中，通過不同的設計，具體(ti) 的方法步驟可有多種。如雙抗體(ti) 夾心法、間接法、競爭(zheng) 法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體(ti) 、應用親(qin) 和素和的ELISA。在今天的技術內(nei) 容中，上海一研為(wei) 您詳解ELISA方法設計的原理根據。

   ELISA以免疫學反應為(wei) 基礎，將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由於(yu) 抗原、抗體(ti) 的反應在一種固相載體(ti) -聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育後，可通過洗滌除去多餘(yu) 的遊離反應物，從(cong) 而保證試驗結果的特異性與(yu) 穩定性。

   應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本水平。用純化的抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入，再與(yu) HRP標記的抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。

   TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品的濃度。

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