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黃體生成激素elisa kit必須標準化

點擊次數:1895 更新時間:2018-10-23

      黃體(ti) 生成激素elisa kit在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為(wei) 合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值後,計算S/N值。也有寫(xie) 作P/N的,這裏的P不代表陽性(positive),而是病(patient)的縮寫(xie) ,不應誤解。為(wei) 避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA試劑盒中,有些作者定出S/N為(wei) 陽性標準,現多為(wei) 各種測定所沿用。

       實際上每一測定係統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為(wei) 不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩衝(chong) 液,以致反應後產(chan) 生的本底可能較正常人血清的本底低得多。陽性判定值(cut-off value)一般為(wei) 陰性對照A值加上一個(ge) 特定的常數,以此作為(wei) 判斷結果陽性或陰性的標準。ELISA試劑盒用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀(yi) 器,並嚴(yan) 格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的係統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。

       現舉(ju) 某種檢測HBsAg的試劑盒為(wei) 例。試劑盒中的陰性對照品為(wei) 不含HBsAg的複鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為(wei) P=9±2ng/ml。每次試驗設2個(ge) 陽性對照和3個(ge) 陰性對照。測得A值後,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩(liang) 個(ge) 平均數的差(P-N)必須大於(yu) 一個(ge) 特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個(ge) 陰性對照A值均應≥0.5×NCX,並≤1.5×NCX,如其中之一超出此範圍,則棄去,而已另兩(liang) 個(ge) 陰性對照重新計算NCX;如有兩(liang) 個(ge) 陰性對照A值超出以上範圍,則該次實驗無效。

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