植物茄呢醇磷酸酶2法由種類和變化可分為以下幾種
法由種類和變化可分為(wei) 以下幾種:
(一)雙抗體(ti) 夾心法
(二)間接法
(三)競爭(zheng) 法
(四)雙位點一步法
(五)捕獲法測IgM抗體(ti)
(六)應用親(qin) 和素和的ELISA
ELISA試劑盒包被用緩衝(chong) 液及zui適包被抗原濃度的優(you) 化
1、包被緩衝(chong) 液的優(you) 化
包被抗原時,為(wei) 了得到的包被效果,我們(men) 采用了碳酸鹽緩衝(chong) 液(50mM ph9.6 )、磷酸鹽緩衝(chong) 液(50mM ph7.6)、以及TRIS鹽酸緩衝(chong) 液(50 mM ph7.6)三種緩衝(chong) 液作為(wei) 包被液,抗原包被濃度為(wei) 5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標抗體(ti) 工作濃度為(wei) 1:400及1:300,用自動酶標儀(yi) 分析,選擇的包被緩衝(chong) 液係統。同時為(wei) 了保證緩衝(chong) 液能夠保存,我們(men) 在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為(wei) 防腐劑。
2、zui適抗原包被濃度的優(you) 化
1、儀(yi) 器值:於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為(wei) 縱坐標(Y),相應的Co III標準品濃度為(wei) 橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Co III含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值範圍:0-800ng/ml
4、敏感度: ng/ml