細節決(jue) 定成敗，這對於(yu) 實驗室科研工作者來說也是如此。在實驗中的各項操作細節有很多，如盡量少用排槍、勤換槍頭，加樣時由低濃度向高濃度加，因為(wei) 這樣可以減少跳孔的幾率。而整個(ge) 實驗的*後關(guan) 鍵就是結果的處理方法了，那麽(me) 在在今天的技術文章中，為(wei) 您帶來的是ELISA試劑盒檢測結果分析方法。

①：ELISA實驗中樣品都要做複孔或三孔，然後計算每個(ge) 濃度標準品的平均OD值，複孔的變異係數應該小於(yu) 20%。

②：平均OD值減去空白孔的OD值。

③：製作標準曲線。

      以減去本底後的OD值為(wei) X軸，標準品的濃度為(wei) Y軸，利用作圖軟件得出一個(ge) 合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數、對數、四參數方程等)並從(cong) 中選擇一條*合適的方程。要想檢驗某條曲線是否與(yu) 表中數據吻合，可以將標準品的濃度作為(wei) 未知數，將對應的OD值帶入該方程，計算出標準品的濃度，得到的結果應該與(yu) 實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度的那條曲線。

       如果出現標準曲線的線性不好，或平行性不好(雙孔對照孔的OD值差別很大)，或出現跳孔的現象，可能引起的原因有酶標板孔間相互汙染、洗板後未能盡快進行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發、酶標板孔問加入的試劑量不同，相對應的解決(jue) 辦法是加樣時請小心勿將液體(ti) 濺人另一孔中，人工洗板時也請小心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板後及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入，切記勿將槍頭接觸到板孔內(nei) ，吸取不同試劑瓶中的液體(ti) 時就要更換一次槍頭、確認孵育環境不透光，蓋板膜將酶標板密封好、使用已校正過的微量加樣器，如將次加入液體(ti) 時槍頭上留有一滴的液體(ti) 滴下，那麽(me) 將以後槍頭上留有的液體(ti) 也滴下，以保證加入液體(ti) 體(ti) 積的一致性。