大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1複蘇操作要點
複蘇操作要點:
1)將培養(yang) 基在37℃水浴鍋預熱;準備一個(ge) 15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yang) 基。
2)將凍存細胞從(cong) 液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中複溫(可準備一潔淨的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出後迅速放入燒杯內(nei) ,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nei) *解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起汙染。
3)用75%酒精擦拭凍存管後再置於(yu) 超淨台內(nei) ,將管內(nei) 細胞轉移至準備好的離心管內(nei) ,輕輕吹打液體(ti) ,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chan) 生氣泡。用新鮮培養(yang) 基洗管壁2次,均轉移至離心管內(nei) 。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yang) 基,吹打製成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nei) ,補加適量的培養(yang) 基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nei) 培養(yang) 。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yang) 基以去除死細胞。繼續培養(yang) ,待細胞長至80~90%匯合時正常傳(chuan) 代。一般剛複蘇的細胞需經過2~3次傳(chuan) 代,細胞活力恢複後才能進行後續的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人宮頸癌細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nei) 膜細胞等。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專(zhuan) 業(ye) 技術指導,另有細胞培養(yang) 類產(chan) 品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、、DMEM、1640培養(yang) 基、細胞培養(yang) 瓶等產(chan) 品。歡迎廣大科研用戶!
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