實驗洗滌方法：

1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與(yu) 吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nei) 液體(ti) ，在潔淨的吸水紙上拍幹，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鍾，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nei) 的液體(ti) ，在厚的吸水紙上拍幹。洗板5次。

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配製時，均需充分混勻，並盡量避免起泡。

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加於(yu) 酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為(wei) 保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體(ti) ，甩幹，每個(ge) 孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鍾內(nei) 配製)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。

3.棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板 3次，每次浸泡1-2分鍾，大約350μl /每孔，甩幹並在吸水紙上輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨(lin) 用前15分鍾內(nei) 配製)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

5.棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鍾左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鍾。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀(yi) 在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀(yi) 電源，預熱儀(yi) 器，設置好檢測程序。

9.實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

穩定表達EBNA1的人胚腎細胞；293E

表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞；293ET

表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞；293KB

Sars結構蛋白表達株；293 001A

Sars結構蛋白表達株；293 001B

Sars結構蛋白表達株；293sars181A

人晶體(ti) 上皮細胞永生係；SRA01/04（HLE）

人胚腎細胞；293FT

人整合SV40基因的乳腺上皮細胞；HBL-100 [HBL100]

人胚腎細胞-F克隆；293F

SV40T轉化人臍靜脈內(nei) 皮細胞；PUMC-HUVEC-T1

人EB病毒轉化的B細胞；CGM1

人整合SV40基因的乳腺上皮細胞；HBL-100 [HBL100]

腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293

SV40轉染人成骨細胞；hFOB 1.19

SV40T轉化的人胚腎細胞；293T

人胚腎細胞；293 Cells, low passage

人正常前列腺基質永生化細胞；WPMY-1

人肝永生化細胞；THLE-3

人胚腎細胞（SV40T基因修飾）；293T/17

人膀胱上皮永生化細胞；SV-HUC-1

人原胚腎轉化細胞；293 Ad5

EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KM932

EB病毒轉化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934

EB病毒轉化的人B淋巴細胞（傣族）；KM9403

EB病毒轉化的人B淋巴細胞（傣族）；KM9405

EB病毒轉化的人B淋巴細胞（拉祜族）；KM9406

EB病毒轉化的人B淋巴細胞（彝族）；HYL

EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KM933

EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KM9401