活化T-細胞核因子2(NFATC2)ELISA試劑盒操作步驟
操作步驟:
1. 標準品的稀釋與(yu) 加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然後在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然後從(cong) di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻後從(cong) 第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從(cong) 第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從(cong) 第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋後各孔加樣量都為(wei) 50μl,濃度分別為(wei) 180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘(yu) 各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為(wei) 5倍)。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體(ti) ,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾。
小鼠(mouse cAMP)
小鼠環磷酸鳥苷(mouse cGMP)
小鼠睫狀神經營養(yang) 因子(mouse CNTF)
小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)
小鼠sCD40配體(ti) (mouse sCD40 Ligand)
小鼠CD34(mouse CD34)
小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(ti) (mouse sCD40L)
小鼠補體(ti) C3a(mouse C3a)
小鼠補體(ti) C5a(mouse C5a)
小鼠血清總補體(ti) (mouse CH50)
小鼠肌酸激酶(mouse CK)
小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)
小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)
小鼠C-肽(mouse C-peptide)
小鼠心肌鈣蛋白T
小鼠粒細胞集落刺激因子(mouse G-CSF)
小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)
小鼠巨噬細胞集落刺激因子(mouse M-CSF)
小鼠(mouse Cytochrome C)
小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)
小鼠多巴胺(mouse Dopamine)
小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)
小鼠D-二聚體(ti) (mouse D-Dimer)
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)
小鼠β內(nei) 啡肽(mouse β-EP)
小鼠表皮生長因子(mouse EGF)
小鼠表皮生長因子受體(ti) (mouse EGF R)
小鼠內(nei) 皮素-1(mouse Endothelin-1)
小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin)
小鼠促紅細胞生成素(mouse EPO)