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血管活性肽酶抑製劑(VPI)檢測試劑盒操作步驟

點擊次數:911 更新時間:2022-03-01

操作步驟:

實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測範圍。

1.         加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鍾。為(wei) 保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.         棄去液體(ti) ,甩幹,不用洗滌。每孔加標記抗體(ti) 工作液100μl(取1μl標記抗體(ti) 加99μl標記抗體(ti) 稀釋液的比例配製,輕輕混勻,在使用前一小時內(nei) 配製),37℃,60分鍾。

3.         溫育60分鍾後,棄去孔內(nei) 液體(ti) ,甩幹,洗板3次,每次浸泡1-2分鍾,350μl/每孔,甩幹。

4.         每孔加辣根過氧化物酶標記親(qin) 和素工作液(同標記抗體(ti) 工作液)100μl,37℃,60分鍾。

5.         溫育60分鍾後,棄去孔內(nei) 液體(ti) ,甩幹,洗板5次,每次浸泡1-2分鍾,350μl/每孔,甩幹。

6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鍾內(nei) ,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,後3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。為(wei) 了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到後應盡快加入終止液。

8.         用酶聯儀(yi) 在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行檢測。

轉錄因子E2F-1抗體(ti)

內(nei) 皮素轉化酶1抗體(ti)

細胞外基質蛋白1抗體(ti)

外胚層發育不良抗體(ti)

E2 tag標簽抗體(ti)

鐵螯合酶抗體(ti)

DH5α大腸杆菌菌體(ti) 蛋白抗體(ti)

磷酸化絲(si) 裂原活化蛋白激酶1/2抗體(ti)

上皮細胞粘附分子抗體(ti)

表皮生長因子抗體(ti)

表皮生長因子受體(ti) 3抗體(ti)

上皮鈣粘附分子抗體(ti)

紅細胞生成素受體(ti) 抗體(ti)

腦啡肽抗體(ti)

EID2蛋白抗體(ti)

上皮細胞粘附分子抗體(ti)

紅細胞膜相關(guan) 蛋白ERMAP抗體(ti)

腺樣癌特異性相關(guan) 抗原抗體(ti) EMC1抗體(ti)

腺樣癌特異性相關(guan) 抗原抗體(ti) EMC1抗體(ti)

染色體(ti) 區域穩定蛋白/核輸出蛋白1抗體(ti)


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