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ELISA試劑盒步驟及原理

點擊次數:987次 更新時間:2016-11-30

步驟及原理

      基本原理:本試劑盒采用雙抗體(ti) 夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體(ti) 包被於(yu) 酶標板上,實驗時標本或標準品中的ENA-78會(hui) 與(yu) 包被抗體(ti) 結合,遊離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體(ti) 和辣根過氧化物酶標記的親(qin) 和素。抗Mouse ENA-78抗體(ti) 與(yu) 結合在包被抗體(ti) 上的Mouse ENA-78結合、與(yu) 親(qin) 和素特異性結合而形成免疫複合物,遊離的成分被洗去。加入發光底物混合液,發光底物在辣根過氧化物酶的催化下發出熒光,用化學發光免疫分析儀(yi) 測定化學發光值(CL),ENA-78濃度與(yu) 化學發光值之間呈正相關(guan) ,通過繪製標準曲線求出標本中ENA-78的濃度。

操作步驟:

1、在各孔中加入標準品或樣品各 100μL,37℃孵育90分鍾

2、倒去孔內(nei) 液體(ti) ,拍幹,加入 100μL  化抗體(ti) 工作液,37℃孵育 60 分鍾

3、洗滌 3 次

4、加入 100μL 酶結合物工作液, 37℃孵育 30 分鍾

5、洗滌 5 次

6、加入 100μL 底物溶液, 37℃孵育 5 分鍾左右

7、讀數

基本原理:本試劑盒采用雙抗體(ti) 夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體(ti) 包被於(yu) 酶標板上,實驗時標本或標準品中的ENA-78會(hui) 與(yu) 包被抗體(ti) 結合,遊離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體(ti) 和辣根過氧化物酶標記的親(qin) 和素。抗Mouse ENA-78抗體(ti) 與(yu) 結合在包被抗體(ti) 上的Mouse ENA-78結合、與(yu) 親(qin) 和素特異性結合而形成免疫複合物,遊離的成分被洗去。加入發光底物混合液,發光底物在辣根過氧化物酶的催化下發出熒光,用化學發光免疫分析儀(yi) 測定化學發光值(CL),ENA-78濃度與(yu) 化學發光值之間呈正相關(guan) ,通過繪製標準曲線求出標本中ENA-78的濃度。

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