目前常用的幾種方法有：測定抗體(ti) 的間接法，測定抗原的雙抗體(ti) 夾心法和測定抗原的競爭(zheng) 法等。本實驗采用間接法測定單克隆抗體(ti) 效價(jia) 。其主要過程為(wei) ：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應板的凹孔內(nei) ，加待測抗體(ti) ，保溫後洗滌以除去未結合的雜蛋白質，加酶標抗抗體(ti) ，保溫後洗滌，加底物保溫30分鍾後，加酸或堿終止酶促反應，用目測或光電。
三、操作步驟
①抗原包被：兔抗人IgG ELISA試劑盒作為(wei) 抗原，用包被液l：8000稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。
②洗滌：次日傾(qing) 去凹孔內(nei) 的液體(ti) ，洗滌液洗3次。
③封閉：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h.
④洗滌：用洗滌液洗3次。
⑤加待測樣品(一抗)：將含單克降抗體(ti) 的細胞培養(yang) 上清在另-塊板上用PBS 連續稀釋(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，每個(ge) 樣品平行做兩(liang) 份，PBS 或空白培養(yang) 基作為(wei) 陰性對照，已知樣品作為(wei) 陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌：用洗滌液洗3次。
⑦加酶標抗抗體(ti) ：兔抗鼠IgG-HRP，用封閉液l ：8000稀釋，100μL／孔，加蓋37℃恒溫箱溫育1h。
⑧洗滌：用洗滌液洗5次，蒸餾水洗2次。
⑨顯色：加新鮮配製的底物溶液100μL/孔，室溫暗處放置5～30min，顯示藍色。
⑩終止反應、比色：加50μL/孔終止液。顏色變黃；用酶標儀(yi) 測定450nm 處各孔的吸光值，陽性反應的zui大稀釋度為(wei) 待測 樣品的效價(jia) 。
    利塞膦酸相關(guan) 物質B標準品        20mg
    相關(guan) 物質混合物標準品        50mg
    膦甲酸相關(guan) 物質B標準品        10mg
    氯甲基碳酸異丙酯標準品        100mg
    洛匹那韋係統適配物標準品        10mg
    相關(guan) 物質A標準品        15mg
    美侖(lun) 孕酮醋酸酯相關(guan) 物質A標準品        25mg
    美侖(lun) 孕酮醋酸酯相關(guan) 物質B標準品        25mg
    相關(guan) 物質D標準品        30mg
    美司那相關(guan) 物質A標準品        50mg
    美司那相關(guan) 物質B標準品        50mg
    美托洛爾相關(guan) 物質A標準品        20mg
    美托洛爾相關(guan) 物質D標準品        50mg
    標準品(2-8℃)        ea
    錳福地吡相關(guan) 物質A標準品        15mg