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星空体育官网中国的配製方法及選購提醒

點擊次數:914次 更新時間:2018-07-23

目前,在實驗室中已經相當的普及了,絕大多數的試劑盒都是用於(yu) 檢測未知樣本中抗原的濃度。而市場中試劑盒並非隨便使用的,需要根據操作者們(men) 的自身條件與(yu) 要求。我們(men) 在選擇星空体育官网中国應該重點考慮實驗類型
雖然星空体育官网中国有多種類型,但是它們(men) 都有一個(ge) 共同特點,就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體(ti) 進行捕獲。In-cellELISA和酶聯免疫斑點ELISPOT是兩(liang) 種特殊的類型,In-cellELISA需要將微孔板中培養(yang) 的細胞進行固定和通透化,然後再用抗體(ti) 原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Westernblot,先在帶膜的微孔板中培養(yang) 細胞,然後在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們(men) 還需要根據自身需要選擇96孔板或是384孔板進行ELISA實驗。
通常人們(men) 使用雙抗夾心法進行ELISA實驗,雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體(ti) 和檢測抗體(ti) 之間,這種方法既靈敏又有效,受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法並不是好的選擇,例如有時候抗原特別小讓兩(liang) 個(ge) 大抗體(ti) 難以附著,又或者抗體(ti) 隻有一個(ge) 抗體(ti) 結合位點。在上述情況下,競爭(zheng) 性ELISA就更為(wei) 適用,這種方法是采用帶標記的純化抗原與(yu) 樣本中無標記的抗原進行競爭(zheng) ,以結合捕獲抗體(ti) 。
單克隆抗體(ti) 和多克隆抗體(ti) 都能夠用於(yu) ELISA,實際上有時候二者結合效果更好。雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體(ti) 與(yu) 檢測抗體(ti) (不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們(men) 不希望捕獲抗體(ti) 與(yu) 檢測抗體(ti) 競爭(zheng) 抗原上的同一位點,為(wei) 此我們(men) 就需要確保捕獲抗體(ti) 和檢測抗體(ti) 所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體(ti) 和檢測抗體(ti) 之間發生了衝(chong) 突,就會(hui) 對實驗結果產(chan) 生較大影響。要避免這一問題,我們(men) 可以選擇購買(mai) “matchedpair”的捕獲/檢測抗體(ti) 對,這些打包在一起的抗體(ti) 是商家經過驗證才的好組合。
根據試劑盒的性能選擇,首先了解星空体育官网中国範圍
星空体育官网中国實驗中為(wei) 了確定信號和背景應將捕獲抗體(ti) (0.5-4μg/ml)和檢測抗體(ti) (0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當範圍內(nei) 的標準品的係列稀釋。按試劑說明書(shu) 常規提供的範圍進行操作。
星空体育官网中国的配製方法:對於(yu) 每種細胞因子應仔細閱讀說明書(shu) ,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書(shu) 中的細節,將凍幹的細胞因子複溶。
第二、多谘詢供應商的技術員,具體(ti) 了解產(chan) 品後再考慮購買(mai)
一般待測抗原標準曲線的線性範圍的可通過將標準品做8次2倍係列稀釋從(cong) 2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物係統可在一定範圍內(nei) 提高靈敏度。為(wei) 了優(you) 化靈敏度,建議孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為(wei) 顯色係統,應嚴(yan) 禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑製過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
第三、星空体育官网中国選購注意事項
1.選擇時間久的試劑盒供應商,以免遇見騙子公司。
2.濃縮洗滌液出現結晶後,請於(yu) 37℃孵育15分鍾
3.選擇並購買(mai) 後在效期內(nei) 使用,不同批號的試劑不能混用。  上一篇 免疫球蛋白G4星空体育官网中国之操作技術的影響 下一篇 E2定量elisa試劑盒檢測GXM定量試驗的臨(lin) 床意義(yi)

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