(1). 抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。

　　(2). 結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性。

　　(3). 酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

　　(4). 受檢標本與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。再加入酶標記的抗原或抗體(ti) ，也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。

　　(5). 此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。

　　(6). 加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物，產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），並且重複性好。以免疫學反應為(wei) 基礎，將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

　　FSH elisa 試劑盒標本的處理：

　　（1）細胞培養(yang) 上清液

　　根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然後按照說明書(shu) 所述方法檢測。稀釋濃度是稀釋5倍。

　　（2）腦脊液

　　根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然後按照說明書(shu) 所述方法檢測。稀釋濃度是5倍。

　　（3）血漿

　　①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鍾，4℃，分離血漿樣品，然後儲(chu) 存在零下80℃直到使用。

　　②用試劑盒中的標準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的幹擾物質影響檢測，按照說明書(shu) 方法檢測。

　　FSH elisa 試劑盒操作步驟：

　　1. 從(cong) 室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條，剩餘(yu) 板條用自封袋密封放回4℃。

　　2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

　　3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

　　4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體(ti) 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

　　5. 棄去液體(ti) ，吸水紙上拍幹，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍幹，如此重複洗板5次（也可用洗板機洗板）。

　　6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nei) ，在450nm波長處測定各孔的OD值。