檢測胱抑素C星空体育官网中国標本時要注意的事情
點擊次數：823次 更新時間：2019-11-13
在檢測胱抑素C星空体育官网中国標本時，需要仔細認真，在遇到問題時冷靜對待。總結了以下幾點需要注意：
1、本宜在新鮮時檢測。如有細菌汙染，菌體(ti) 中可能含有內(nei) 源性HRP,也會(hui) 產(chan) 生假陽性反應。
保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍結標本溶解後，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混合，不要在混勻器上強烈震蕩。
3、渾濁或有沉澱的標本應先離心或過濾，澄清後再檢測。
4、反複凍融會(hui) 使蛋白效價(jia) 降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。
ELISA實驗標準曲線平直，一般有以下原因：標準曲線製備是否不當，洗孔不淨，吸孔不充分，讀數不準確或是吸量誤差。查找原因，即可找到相應解決(jue) 方案。
檢測目的是為(wei) 實驗提供準確可靠定量分析實驗依據。為(wei) 保證實驗數據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全麵質量控製和全過程質量控製。
胱抑素C星空体育官网中国操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chan) 生加樣上的誤差。
2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定，能使用複孔的盡量做複孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋後加入50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。
3． 加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的標記的抗體(ti) 。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4． 甩去孔內(nei) 液體(ti) ，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5． 每孔加入80ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鍾。
6． 甩去孔內(nei) 液體(ti) ，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鍾。避免光照。
8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液後應立即測定結果。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。
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