為您介紹下白三烯D4星空体育官网中国的實驗要點
點擊次數:886次 更新時間:2020-10-16
為(wei) 您介紹下白三烯D4星空体育官网中国的實驗要點
ELISA是Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay的簡稱,即酶聯免疫吸附測定,是研究蛋白抗體(ti) 的重要方法。它采用抗原與(yu) 抗體(ti) 的特異反應將待測物與(yu) 酶進行直接或間接結合,然後通過酶與(yu) 底物產(chan) 生顏色反應,進行定性和定量分析。ELISA大致分為(wei) 五種類型:直接法、間接法、競爭(zheng) 法、夾心法、捕獲包被法。在商品化試劑盒中用得比較多的是雙抗體(ti) 夾心法、競爭(zheng) 法和間接法。
要做ELISA實驗就少不了試劑盒,下麵我們(men) 就以白三烯D4星空体育官网中国為(wei) 例,為(wei) 大家介紹一下。
白三烯D4星空体育官网中国除正常試驗外,還需注意這幾個(ge) 要點
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則後麵的實驗結果無從(cong) 談起。
2、設置標準曲線樣品的標準濃度範圍要有一個(ge) 比較大的跨度,並且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度範圍之內(nei) ,包括上限和下限。而對於(yu) 呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的範圍內(nei) 。
3、試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用後請立即按照說明書(shu) 要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉汙染。
4、加樣:加樣時,要控製加樣速度,避免*孔與(yu) zui後一孔之見的時間間隔過大,否則將會(hui) 導致不同的預孵育時間,從(cong) 而影響實驗的準確性以及重複性;一般加樣時間控製在10分鍾內(nei) ,如果樣本數量過多,可使用多道移液器。
5、孵育:樣品要在密閉的容器內(nei) 進行孵育,嚴(yan) 格按照說明書(shu) 上規定的孵育時間和溫度進行。
6、洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍幹,同時要消除板底殘留的液體(ti) 和手指痕跡,避免影響zui後的酶標儀(yi) 讀數。
7、反應時間的控製:加入底物後請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,10分鍾左右),如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。
8、建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
9、建議使用白三烯D4星空体育官网中国時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個(ge) 標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產(chan) 品本身以外的任何損失。
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