實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

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細胞名稱  胰腺癌細胞；HS766T
形態特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞1973年由R.Owens等建係，源自62歲白人男性的胰腺癌的轉移淋巴結。

培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳(chuan) 代方法: 1:2～1:8傳(chuan) 代，每周換液2～3次

傳(chuan) 代情況: C4

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 培養(yang) 法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
維生素D結合蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 人肝癌細胞；Hep3b形態特性: 上皮細胞樣Vitamin D-binding protein 1

3-甲氧基檢測試劑盒細胞名稱: 人內(nei) 膜腺癌細胞；KLE形態特性: 上皮細胞樣3-normetanephrine

血小板內(nei) 皮細胞聚集受體(ti) 1檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞；MDA-MB-361形態特性: 上皮細胞樣Platelet endothelial aggregation receptor 1

冠蛋白1C檢測試劑盒細胞名稱: 人淋巴母細胞（EBV轉化）；NCI-BL2009形態特性: 淋巴母細胞樣Coronin 1C

硒磷合成酶1檢測試劑盒細胞名稱: 人導管癌細胞；MDA-MB-134Ⅵ形態特性: 上皮細胞樣selenophosphate synthetase I

組蛋白去乙酰化酶2檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞；NCI-H2009形態特性: 上皮細胞樣Histone Deacetylase 2

丁型肝炎病抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 豬腎細胞；PK(15)形態特性: 上皮細胞樣Hepatitis D virus antibody

26S蛋白酶體(ti) 非ATP酶調節亞(ya) 基13檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠胰島β細胞瘤細胞；RIN-m5F形態特性: 上皮細胞樣26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 13

LIM和SH3結構域蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1形態特性: 淋巴母細胞樣LIM and SH3 domain protein 1

S-骨膠原交聯檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7E7形態特性: 淋巴母細胞樣beta-crosslaps

胰高血糖素樣肽2受體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: SV-40轉化肺成纖維細胞；WI38/VA13形態特性: 上皮細胞樣ghcagons-like pepfide 2 receptor

狀瘤病16型檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠B細胞雜交瘤細胞；W6/32形態特性: 淋巴母細胞樣papillomavirus 16

狀瘤病18型檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞；SPC-A1形態特性: 上皮細胞樣papillomavirus 18

鐵過氧化物岐化酶檢測試劑盒細胞名稱: 人滑膜肉瘤細胞；SW982形態特性: 多角Fe-Superoxide dismutase

前血小板性蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞；VeroE6形態特性: 上皮細胞樣PPBP;CXCL7

泛素蛋白連接酶E3成分N-識別蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7B5形態特性: 淋巴母細胞樣Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 1

拓撲異構酶Ⅱ檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；NCI-H716形態特性: 上皮細胞樣Topoisomerase Ⅱ
胰腺癌細胞；HS766T異72581-71-6英文名：Isosilybin  

英文別名：-(2,3-Dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(hydroxymethyl)-1,4-benzodioxin-6-yl)-2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-4H-1-benzopyran-4-one  

CAS登錄號：72581-71-6

分子式：C25H22O10

分子量：482.44

分子結構：

外觀：類白色結晶

規格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用於(yu) 含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：菊科植物水飛薊（Silybum marianum L.Gaertn.）幹燥果實

溶解性：可溶於(yu) 、、ＤＭＳＯ等溶劑，不溶於(yu) 。

藥理藥效：抗氧化、消炎、抗腫瘤等作用。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年