綜合微生物的培養(yang) 方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)製備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配製培養(yang) 材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yang) ;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yang) ;
(5)分離並檢測;
(6)取液儲(chu) 存;通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強,培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
規格參數:
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鞘氨醇杆菌屬規格 | Sphingobac | EY-J963346 |
資源名稱: 鞘氨醇杆菌屬
種屬: Sphingobacterium sp.
分離基物: 原料乳
提供形式: 凍幹物
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 可導致乳品蛋白變性
培養(yang) 基: 哥倫(lun) 比亞(ya) 血平板
生長條件: 30℃,好氧24h,鏡檢為(wei) 陰性杆菌,菌種純。
存儲(chu) 條件: 真空冷凍幹燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個(ge) 月,若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個(ge) 月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中,密封於(yu) 安瓿管內(nei) ,然後控製冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置於(yu) -150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) :
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基,培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1%,氮源不超過0.5%),碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境,不利於(yu) 放線菌孢子的形成,氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下,幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃,少數為(wei) 37 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 5~14天。
⑵ 黴菌孢子的製備
黴菌的孢子培養(yang) ,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖,而且這類培養(yang) 基的表麵積較大,可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25~28 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 4~14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*,並易被菌體(ti) 分解利用,氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃,子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備
種子罐種子製備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中,經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ,這樣的種子稱為(wei) 一級種子,把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ,經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ,這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子,將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為(wei) 四級發酵。
Penicillium islandicum 中文名稱:島青黴Penicillium islandicum提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧存儲(chu) 條件:真空冷凍幹燥法 純度:98%
Penicillium cyclopiumWestling=Penicillium aurantiogriseum 中文名稱:園弧青黴=桔灰青黴Penicillium cyclopiumWestling=Penicillium aurantiogriseum提供形式:凍幹安全等級:1模式菌株:no應用領域:降解DNA培養(yang) 方法培養(yang) 基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:28-30℃,好氧 純度:98%
PenicilliumcorylophilumDierckx 中文名稱:頂青黴PenicilliumcorylophilumDierckx安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chan) 磷二脂酶培養(yang) 方法培養(yang) 基:15生長條件:25-26℃ 純度:96%
Penicillium citreo-viride 中文名稱:黃綠青黴Penicillium citreo-viride提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧存儲(chu) 條件:真空冷凍幹燥法 純度:96%
Penicillium chrysogenum Thom 中文名稱:產(chan) 黃青黴Penicillium chrysogenum Thom提供形式:凍幹/斜麵安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:察氏瓊脂:Sucrose (蔗糖) 30g NaNO3 3g MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1g Agar (瓊脂) 13g Distilled war (蒸餾) 1000ml pH 7.2生長條件:25-26℃,好氧存儲(chu) 條件:2-8℃ 純度:96%
PenicilliumadametziZaleski 中文名稱:阿達青黴PenicilliumadametziZaleski安全等級:1模式菌株:no應用領域:從(cong) 望遠鏡分離,光學儀(yi) 器防黴試驗菌培養(yang) 方法培養(yang) 基:15生長條件:25-26℃ 純度:≥99%
Paecilomycesheliothis(Charles)BrownetSmith 中文名稱:棉鈴蟲擬青黴Paecilomycesheliothis(Charles)BrownetSmith安全等級:1模式菌株:no應用領域:生物防治培養(yang) 方法培養(yang) 基:14,17生長條件:25-26℃ 純度:97%,順式和反式混合物
Paecilomycesfumosa-roseus(Wize)BrownetSmith 中文名稱:玫煙色擬青黴Paecilomycesfumosa-roseus(Wize)BrownetSmith安全等級:1模式菌株:no應用領域:生物防治培養(yang) 方法培養(yang) 基:14,17生長條件:25-28℃ 純度:97%,順式和反式混合物
鞘氨醇杆菌屬規格Dermasel 瓊脂 (CM0539)脫氧野尻黴素(DNJ)單硝異山梨酯S100B S100B蛋白抗原
沙保氏麥芽糖瓊脂 (CM0041a)劍麻皂苷元苯基三乙基S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽
產(chan) 氣莢膜菌瓊脂基礎 (OPSP) (CM0543)檸檬苦素苯基三乙基S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1) 鈣結合蛋白S100A1抗原
葡萄糖酵母提取物選擇性培養(yang) 基(OGYE培養(yang) 基) (CM0545)諾米林4--2-苯SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基質結合區結合蛋白1抗原
虎瓊脂基礎 (CM0549)4--2-苯SCF (Stem Cell Factor) 幹細胞生長因子抗原
假單胞菌瓊脂基礎 (CM0559)羅漢果皂甙V5-吲哚SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗原
十六烷基瓊脂 (CM0579)安石榴甙1,2-二(三乙氧矽烷基)乙烷CXCL14(CXC-chemokine ligand 16) CXC趨化因子14抗原
產(chan) 氣莢膜菌瓊脂基礎 (TSC/SFP) (CM0587)獐牙菜苦苷1,2-二(三乙氧矽烷基)乙烷CXCL16 peptide CXC趨化因子16抗原