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產品名稱:
神經膠質瘤細胞;H4
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產品特點:
神經膠質瘤細胞;H4相關產品:
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  神經膠質瘤細胞;H4的詳細資料:

公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:

產(chan) 品名稱

生長特性

貨號

神經膠質瘤細胞;H4

貼壁生長

EY-X63633

細胞名稱  神經膠質瘤細胞;H4
形態特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: H4細胞係建係於(yu) 1973年。它衍生於(yu) 一個(ge) 患神經膠質瘤的37歲病人的腦組織。該細胞的致瘤特性己經被屏蔽,細胞接種動物一般不產(chan) 生腫瘤結節。該細胞具有修複MNNG損傷(shang) 5型腺病毒的能力。

培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,2-3天傳(chuan) 一代

傳(chuan) 代情況: C228

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 陰性

冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;JF-CD4-1-2A10 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

dried細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;YTT-2 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;2D2-C1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Alternaria atra (Preuss) Woudenberg et Crous細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;1B5

癌拉丁屬名: Rhizobium  giardinii2-甲基丁酸2-甲基丁酯Human PSMD13 ELISA Kit
人瘤狀甲狀腺癌拉丁屬名: Burkholderia cepacia2-甲基丁酸2-甲基丁酯Human PSMB3 ELISA Kit
長尾綠猴胚胎拉丁屬名: Aureobasidium  pullulans9-氯甲基蒽Human PSMD2 ELISA Kit
長尾綠猴腎拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus9-氯甲基蒽Human PSMB6 ELISA Kit
小鼠SRSV轉化的3T3拉丁屬名: Escherichia coli磺多辛Human PSMD3 ELISA Kit
褐鼠胰島素瘤上皮拉丁屬名: Aspergillus  niger磺多辛Human PSMD5 ELISA Kit
小鼠X小鼠拉丁屬名: Cystofilobasidium  capitatum雙乙二酸酸鋰Human PSMB7 ELISA Kit
人陰戶磷癌拉丁屬名: Aspergillus  niger雙乙二酸酸鋰Human PSMC2(Proteasome 26S subunit ATPase 2) ELISA Kit
小鼠脂肪用途: 害蟲生物防治Dapivirine (TMC120)Human CECR1(Adenosine deaminase CECR1) ELISA Kit
小鼠胚胎肝拉丁屬名: Aspergillus  niger2-氨基-3-基吡啶Human PSMC1 ELISA Kit
小鼠星型膠質拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae2-氨基-3-基吡啶Human PSMC4(Proteasome 26S subunit ATPase 4)  ELISA Kit
大鼠肺微血管內皮拉丁屬名: Fusarium avenaceum2,6-二異基苯(DIPA)Human PSMC6(Proteasome 26S subunit ATPase 6)  ELISA Kit
小鼠腎髒內髓集合管3上皮拉丁屬

神經膠質瘤細胞;H4澱粉-雙岐杆菌鑒定規格:20支詳情介紹

特殊蛋白腖規格:250g用途:培養(yang) 基原材料,提供豐(feng) 富的營養(yang) 成份

三糖鐵管規格:5ml*20支/包用途:用於(yu) 腸杆菌科細菌的生化反應篩選

水稻水培養(yang) 液規格:250g用途:用於(yu) 水稻的水培養(yang) 液

TGC培養(yang) 基規格:250g用途:用於(yu) 藥品,生物製品需氧菌和厭氧菌的無菌試驗(JAPAN 標準)

藥敏紙片 別名:氨苄規格:10ug/片,20片/瓶用途:抗菌藥物體(ti) 外敏感性試驗
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。

 

產品相關關鍵字: 神經膠質瘤細胞 H4
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