綜合微生物的培養(yang) 方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)製備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配製培養(yang) 材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yang) ;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yang) ;
(5)分離並檢測;
(6)取液儲(chu) 存;通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強,培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
規格參數:
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
冬蟲夏草(斜麵)說明書(shu) | Ophiocordy | EY-J963312 |
資源名稱: 冬蟲夏草(斜麵)
種屬: Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hywel-Jones
提供形式: 斜麵培養(yang) 物
模式菌株: no
應用領域: 研究;教學。食藥用菌
培養(yang) 基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然,121℃,15min。
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個(ge) 月,若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個(ge) 月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中,密封於(yu) 安瓿管內(nei) ,然後控製冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置於(yu) -150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) :
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基,培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1%,氮源不超過0.5%),碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境,不利於(yu) 放線菌孢子的形成,氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下,幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃,少數為(wei) 37 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 5~14天。
⑵ 黴菌孢子的製備
黴菌的孢子培養(yang) ,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖,而且這類培養(yang) 基的表麵積較大,可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25~28 ℃,培養(yang) 時間為(wei) 4~14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*,並易被菌體(ti) 分解利用,氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃,子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備
種子罐種子製備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中,經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ,這樣的種子稱為(wei) 一級種子,把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ,經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ,這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子,將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵,稱為(wei) 三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為(wei) 四級發酵。
Burkholderia vietnamiensis 中文名稱:越南伯克霍爾德氏菌Burkholderia vietnamiensis提供形式:凍幹安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:33或109生長條件:30℃ 純度:98%
Kurthiasibirica 中文名稱:西伯利亞(ya) 庫特氏菌Kurthiasibirica安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:107生長條件:25℃ 純度:97%
Viridibacillusarenosi 中文名稱:ViridibacillusarenosiViridibacillusarenosi分離基物:土壤,荷蘭(lan) 安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:110生長條件:30℃ 純度:97%
Rummeliibacillusstabekisii 中文名稱:RummeliibacillusstabekisiiRummeliibacillusstabekisii安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:2生長條件:30℃ 純度:97%
Acidovorax│facilis 中文名稱:敏捷食菌Acidovorax│facilis提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:yes培養(yang) 方法培養(yang) 基:A2生長條件:30℃存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍幹燥法 純度:CP,98%
Pseudomonasluola 中文名稱:PseudomonasluolaPseudomonasluola分離基物:人類傷(shang) 口安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:104生長條件:30℃ 純度:指示劑級
Thalassospirapermensis 中文名稱:ThalassospirapermensisThalassospirapermensis分離基物:鹽礦附近的汙染土壤安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:102生長條件:30℃ 純度:指示劑級
Maritimibacralkaliphilus 中文名稱:MaritimibacralkaliphilusMaritimibacralkaliphilus分離基物:海,大西洋安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:102生長條件:30℃ 純度:≥99%
冬蟲夏草(斜麵)說明書(shu) 50260人支氣管上皮細胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽
50270人氣管上皮細胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標簽抗原
50240人小氣道上皮細胞微小RNA炔胺鹽鹽V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原
酵母提取(膏)人肺成纖維細胞微小RNA炔胺鹽鹽KT3 tag KT3 tag標簽抗原
50090人支氣管平滑肌細胞微小RNA環磺酰胺VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標簽抗原
50092人氣管平滑肌細胞微小RNA環磺酰胺HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原
50093人骨骼肌細胞微小RNAHLA-E 人類白細胞抗原E
50094人骨骼肌衛星細胞微小RNAAnti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原