公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肺腺癌細胞；Calu-3 | 貼壁生長 | EY-X63233 |
細胞名稱 肺腺癌細胞；Calu-3
形態特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是從(cong) 一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的；該患者曾使用過、、進行治療。該細胞接種至裸鼠可成瘤；可作轉染宿主。
培養(yang) 條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代；每周1~2次。難消化，需鏡下觀察。
傳(chuan) 代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 培養(yang) 法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
癌-熒光素酶標記拉丁屬名: Mucor exponens1, 2-二氯-3-代苯Human RARG ELISA Kit
人肝癌（低轉）-熒光素梅標記注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用1, 2-二氯-3-代苯Human RANBP3L ELISA Kit
人肺癌-熒光素梅標記拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum2-氯-5-甲氧基苯Human RARRES3 ELISA Kit
人肺腺癌-熒光素梅標記注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2-氯-5-甲氧基苯Human RAD9A ELISA Kit
人肝癌-熒光素梅標記注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用1,3-二氯四甲基二矽氧烷Human RAD51B(DNA repair protein RAD51 homolog 2) ELISA Kit
小鼠肝癌-熒光素梅標記拉丁屬名: Lactobacillus sp.1,3-二氯四甲基二矽氧烷Human RADIL ELISA Kit
人骨髓間充質幹拉丁屬名: Penicillium melinii2,3-二氯吡啶Human PTPRQ(Phosphotidylinositol phosphatase PTPRQ) ELISA Kit
人牙髓幹注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2,3-二氯吡啶Human Radixin ELISA Kit
人牙周膜幹拉丁屬名: Bacillus subtilis2,3-二氯吡啶Human RAF1 ELISA Kit
小鼠肝癌拉丁屬名: Acinetobacter lwoffii2,6-二氯吡啶Human RAE1 ELISA Kit
C57BL/6小鼠纖維肉瘤拉丁屬名: Lysinibacillus sp.2,6-二氯吡啶Human RAI1 ELISA Kit
人-熒光素酶標記拉丁屬名: Micromonospora sp.2,6-二氯吡啶Human RAI14 ELISA Kit
人非小肺癌GFP熒光穩轉株拉丁屬名: coli6-溴-2H-1,4-苯並噁-3(4H)-酮Human RALA ELISA Kit
人非小肺癌 -熒光素酶標記拉丁屬名: 宿主：DH5α，BL21 6-溴-2H-1,4-苯並噁-3(4H)-酮Human RAI14 ELISA Kit
大鼠膠質瘤-熒光素酶標記注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2,2-雙(2-羥基-5-聯苯基)烷Human RAI1 ELISA Kit
人胃癌耐藥株注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用2 - 二苯基膦-2' - （N組，n -二基） - 聯苯Human RALA ELISA Kit
人耐藥株拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae2 - 二苯基膦-2' - （N組，n -二基） - 聯苯Human RALBP1 ELISA Kit
人肺腺癌耐藥性注意事項: 僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用乙酸(1S,2R)-2-[N-苄基-N-(*苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[交叉反應用試劑]Human RALB(Ras-
肺腺癌細胞；Calu-3小鼠半胱氨蛋白酶抑製劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒AGRPELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠轉鐵蛋白受體(ti) (TFR/CD71)ELISA試劑盒aGTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠骨特異性性磷酶B(ALP-B)ELISA試劑盒aGTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒aGTELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒AHAELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒AhCGAbELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒AhRELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
小鼠骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒AIFELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。
