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星空体育官网站   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>白犛牛皮膚細胞;Yak-2
 
產品名稱:
白犛牛皮膚細胞;Yak-2
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產品報價:
產品特點:
白犛牛皮膚細胞;Yak-2相關產品:
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  白犛牛皮膚細胞;Yak-2的詳細資料:

公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:

產(chan) 品名稱

生長特性

貨號

白犛牛皮膚細胞;Yak-2

貼壁生長

EY-X63826

細胞名稱  白犛牛皮膚細胞;Yak-2
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雄性白犛牛的耳組織。2004年由中科院昆明細胞庫建立。

培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次

傳(chuan) 代情況: P4

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)

冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
胞裂蛋白9檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBRP3-12形態特性: 淋巴母細胞樣Septin-9

牛痘病IgM檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBR96形態特性: 淋巴母細胞樣vaccinia Viruses IgM

唾液睾檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB8H7A形態特性: 淋巴母細胞樣Testoterone

趨化因子20檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB4G12-13形態特性: 淋巴母細胞樣C-X-C motif chemokine  20

趨化因子28檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB1R10F11形態特性: 淋巴母細胞樣C-X-C motif chemokine  28

空泡素相關(guan) 蛋白A抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB12R13D7形態特性: 淋巴母細胞樣Vacuolating cytotoxin A antibody

腦膜炎奈瑟氏菌檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB11R2F8形態特性: 淋巴母細胞樣N.meningitidis

類免疫缺陷病檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-28A形態特性: 淋巴母細胞樣Immunodeficiency virus

V-Erb B2紅白血病病癌基因同源物3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-75A形態特性: 淋巴母細胞樣Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3

抗膜聯蛋白A2抗體(ti) 檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBRP3-17形態特性: 淋巴母細胞樣Anti Annexin A2 antibody

CFP10-ESAT6融合蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB2G10形態特性: 淋巴母細胞樣CFP10-ESAT6P

D3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-63D形態特性: 淋巴母細胞樣anti ganglioseside D3

羥色胺檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-35B形態特性: 淋巴母細胞樣serotonin

組織蛋白酶G檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-151K形態特性: 淋巴母細胞樣Cathepsin G

小異二聚體(ti) 伴侶(lv) 2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-4C形態特性: 淋巴母細胞樣small heterodimer partner 2

G1-S特異性細胞周期蛋白E1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB5F12AD3形態特性: 淋巴母細胞樣G1/S-specific cyclin-E1

再生胰島衍生3α;胰石蛋白;胰線蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人神經母細胞瘤細胞;SH-SY5Y形態特性: 上皮細胞樣Regenerating Islet-derived 3 Alpha;pancreatic Stone Protein;pancreatic Thread Protein
白犛牛皮膚細胞;Yak-2肝浸粉規格:100g用途:培養(yang) 基原材料,為(wei) 營養(yang) 要求高的細菌提供生長營養(yang) 成份

營養(yang) 瓊脂(水質監測)規格:250g用途:用於(yu) 銅綠假單胞菌純化培養(yang)

結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)規格:250g用途:用於(yu) 腸道菌計數和腸杆菌科鑒別

225ml 7.5%化鈉肉湯均質袋規格:10個(ge) /包用途:用於(yu) 金葡菌前增菌培養(yang)

10%化鈉胰酪腖大豆肉湯顆粒規格:225ml/袋*10拉丁屬名:1% NaCl Trypticase Soy Broth

孟加拉紅(虎紅)(Sigma)規格:10g用途:微生物指示劑
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。

 

產品相關關鍵字: 白犛牛皮膚細胞 Yak-2
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