公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4 | 貼壁生長 | EY-X64020 |
細胞名稱 小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是CJEaves從(cong) (C57BL/6JXC3H/HeJ)F1小鼠的骨髓基質中分離建立的。M2-10B4表達層粘連蛋白和膠原蛋白IV,但並不表達膠原蛋白I。在培養(yang) 體(ti) 係中該細胞支持人或鼠的骨髓組織生成。
培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,2-3天傳(chuan) 一代
傳(chuan) 代情況: C7
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
抗貓細小病抗體(ti) 檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS不發說明書(shu) ,僅(jin) 供下單
胰十二指腸同源框-1基因檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBSpancreatic and duodenal homeobox factor 1
N-甲基-D-天門冬氨(NMDA)受體(ti) A1亞(ya) 單位NR4檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSN-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 4A1
II檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSPepsin II
生長分化因子11檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSgrowth differentiation factot 11
CD13分子檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSCluster of differentiation 13
腫瘤壞死因子相關(guan) 弱凋亡誘導因子檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSTumor Necrosis Factor-Like Weak Inducer of Apoptosis
熱休克蛋白-90α1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSHeat Shock Protein 90α1
熱休克蛋白-90β1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSHeat Shock Protein 90β1
線粒體(ti) 開放閱讀框12S rRNA-C檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSMitochondrial Open Reading Frame Of The 12S rRNA-c
N-乙酰對位醌亞(ya) 胺檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSN-acetyl-1,4-benzoquinone imine
封閉蛋白11檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSClaudin-11
粉塵蟎特異性IgE抗體(ti) 檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素specific IgE against dust mite
γ-氨基丁A型受體(ti) 檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素γ-Aminobutyric acid Receptor A
屋塵蟎特異性IgE抗體(ti) 檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素HDM-IgE
弓形蟲循環抗原檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素toxoplasma circulating antigen
屋塵蟎特異性IgG1抗體(ti) 檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素HDM-IgG1
小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4膽81-25-4中文別名:3α,7α,12α-三羥膽;膽甾
英文名:Cholic acid
CAS登錄號:81-25-4
分子式:C24H40O5
分子量:408.58
分子結構:
外觀:白色或類白色粉末
規格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用於(yu) 含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:由肝合成,隨膽汁排入到十二指腸內(nei) ,作為(wei) 消化液的組成部分之一,能促進對脂類物質的消化和吸收。
熔點:197-203℃
旋光度:+35°~37.0°
藥理藥效:膽是非變性離子去垢劑,用於(yu) 抽提膜蛋白。用於(yu) 生化研究,醫藥中間體(ti) 。膽鈉是利膽藥,治療膽囊炎;膽汁缺乏;腸道消化不良等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。