綜合微生物的培養(yang) 方法，包括以下步驟：
（1）前期準備：（A）滅菌處理；（B）製備Biolite水；（C）檢查設備和材料；
（2）按比例配製培養(yang) 材料；
（3）導入曝氣，進行繁殖培養(yang) ；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yang) ；
（5）分離並檢測；
（6）取液儲(chu) 存；通過該綜合微生物培養(yang) 方法簡單可操作性強，培養(yang) 的綜合微生物均在3代以內(nei) ，菌類穩定不發生突變，且繁殖快速。
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規格參數：

資源名稱: pETBlue-2

種屬: pETBlue-2 plasmid

提供形式: 質粒幹粉

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 質粒載體(ti)

培養(yang) 基: 原核抗性：Amp； 克隆菌株：DH5α； 培養(yang) 條件：37℃。LB培養(yang) 基，含50μg/mL氨苄鈉。

存儲(chu) 條件: 4℃避光保存；運輸條件：常溫運輸。
低溫存法:
①簡單保存法，將瓊脂斜麵孢子培養(yang) 物、菌絲(si) 懸浮液以及由麩皮、大米、小米等穀物原料製成的孢子培養(yang) 物置於(yu) 4℃冰箱保存,保存時間不超過1～2個(ge) 月，若將穀物原料製備的孢子瓶抽真空並在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3～4個(ge) 月；②液氮超低溫保存法，將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體(ti) 中，密封於(yu) 安瓿管內(nei) ，然後控製冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時，即可置於(yu) -150～-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體(ti) 、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍幹燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yang) ：
⒈ 孢子製備
⑴ 放線菌孢子的製備
一般采用瓊脂斜麵培養(yang) 基，培養(yang) 基中含有一些適合產(chan) 孢子的營養(yang) 成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白腖和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐(feng) 富(碳源約為(wei) 1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐(feng) 富容易造成酸性的營養(yang) 環境，不利於(yu) 放線菌孢子的形成，氮源豐(feng) 富則有利於(yu) 菌絲(si) 繁殖而不利於(yu) 孢子形成。一般情況下，幹燥和限製營養(yang) 可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜麵的培養(yang) 溫度大多數為(wei) 28 ℃，少數為(wei) 37 ℃，培養(yang) 時間為(wei) 5～14天。
⑵ 黴菌孢子的製備　
黴菌的孢子培養(yang) ，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nong) 產(chan) 品為(wei) 培養(yang) 基。這是由於(yu) 這些農(nong) 產(chan) 品中的營養(yang) 成分較適合黴菌的孢子繁殖，而且這類培養(yang) 基的表麵積較大，可獲得大量的孢子。黴菌的培養(yang) 一般為(wei) 25～28 ℃，培養(yang) 時間為(wei) 4～14天。
⒉ 種子製備
⑴ 搖瓶種子製備　
搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩(liang) 級培養(yang) ，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yang) 基要求比較豐(feng) 富和*，並易被菌體(ti) 分解利用，氮源豐(feng) 富有利於(yu) 菌絲(si) 生長。原則上各種營養(yang) 成分不宜過濃，子瓶培養(yang) 基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yang) 基配方。
⑵ 種子罐種子製備　
種子罐種子製備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為(wei) 一級種子、二級種子和三級種子的製備。孢子(或搖瓶菌絲(si) )被接入到體(ti) 積較小的種子罐中，經培養(yang) 後形成大量的菌絲(si) ，這樣的種子稱為(wei) 一級種子，把一級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵，稱為(wei) 二級發酵。如果將一級種子接入體(ti) 積較大的種子罐內(nei) ，經過培養(yang) 形成更多的菌絲(si) ，這樣製備的種子稱為(wei) 二級種子，將二級種子轉入發酵罐內(nei) 發酵，稱為(wei) 三級發酵。同樣道理，使用三級種子的發酵，稱為(wei) 四級發酵。
Trameshirsuta 中文名稱：粗毛栓菌Trameshirsuta分離基物:空氣提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:no培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yang) 基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L，葡萄糖20.0g，瓊脂15.0g，pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長條件:25℃;好氧存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍幹燥法 純度：97%

Alcaligenesfaecalis 中文名稱：糞產(chan) 杆菌Alcaligenesfaecalis提供形式:凍幹物安全等級:2模式菌株:no應用領域:《GB4789.28培養(yang) 基:和試劑的質量要求》標準菌株。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0002;營養(yang) 肉汁瓊脂;蛋白腖5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。[注]培養(yang) 芽孢杆菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利於(yu) 產(chan) 生芽孢。生長條件:37℃;存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍幹燥法 純度：95%

Brachybacriumnesrenkovii 中文名稱：涅氏小短杆菌Brachybacriumnesrenkovii分離基物:牛奶提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:yes培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0033;LB培養(yang) 基:(LBMedium);蛋白腖10.0g，酵母5.0g，NaCl10.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。生長條件:28℃;好氧存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍幹燥法 純度：95%

Bradyrhizobiumelkanii 中文名稱：埃氏慢生根瘤菌Bradyrhizobiumelkanii分離基物:大豆提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:分類學研究。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0009;根瘤菌培養(yang) 基:-1(Rhizobiummedium);酵母1.0g，10.0g，土壤提取液200ml，瓊脂15.0g，蒸餾800ml，pH7.2。土壤提取液生長條件:30℃;好氧存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍幹燥法 純度：98%

Bacilluseiseniae 中文名稱：蚯蚓芽胞杆菌Bacilluseiseniae分離基物:蚯蚓腸道提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:芽胞杆菌分類鑒定模式菌株:。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0002;營養(yang) 肉汁瓊脂;蛋白腖5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。[注]培養(yang) 芽孢杆菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利於(yu) 產(chan) 生芽孢。生長條件:30℃;好氧存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍幹燥法 純度：98%

Bacillusmycoides 中文名稱：蕈狀芽胞杆菌Bacillusmycoides提供形式:凍幹物安全等級:1模式菌株:no應用領域:《GB4789.28培養(yang) 基:和試劑的質量要求》標準菌株。培養(yang) 方法培養(yang) 基:CM0002;營養(yang) 肉汁瓊脂;蛋白腖5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。[注]培養(yang) 芽孢杆菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利於(yu) 產(chan) 生芽孢。生長條件:30℃;好氧存儲(chu) 條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍幹燥法500 純度：98%

Enrococcusdurans(Streptococcusdurans) 中文名稱：耐久腸球菌(堅韌鏈球菌)Enrococcusdurans(Streptococcusdurans)安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:116或114生長條件:37℃ 純度：≥98%

Enrococcus cecorum 中文名稱：盲腸腸球菌Enrococcus cecorum分離基物:雞盲腸提供形式:凍幹安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yang) 方法培養(yang) 基:哥倫(lun) 比亞(ya) 血平板生長條件:37℃，5%CO2，24h，鏡檢為(wei) 陽性球菌。 純度：97%
pETBlue-2PALCAM Listeria selective-Supplement acc.to van Netten et al PALCAM人膀胱平滑肌細胞cDNA3-乙烯基苯AU1 tag peptide  AU1 tag標簽多肽

李斯特氏菌選擇添加劑人尿道上皮細胞cDNA3-乙烯基苯Glu-Glu Tag peptide  Glu-Glu Tag多肽蛋白

L-PALCAM-Listeria selective enrichment broth( base) acc.van Netten et al. L-PALCAM 李斯特氏菌選擇富集肉湯（基礎）人膀胱基質成纖維細胞cDNA3-乙烯基苯CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2)  環核苷陽離子通道蛋白α2抗原

Peptone water( buffered) 緩衝(chong) 蛋白腖水人前列腺上皮細胞cDNA鹽金剛乙胺CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase)  C型鈉尿肽抗原

Phenol-re broth( base) 酚紅肉湯（六亞(ya) ）人前列腺成纖維細胞cDNA鹽金剛乙胺CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor)  睫狀神經營養(yang) 因子抗原

Plate count agar Casein-peptone dextrose yeast extract agar人前列腺平滑肌細胞cDNA3-基苯factor V(Vcoagulation factor)  5抗體(ti)

平板計數瓊脂/酪蛋白右旋糖酵母瓊脂人顱骨造骨細胞cDNA3-基苯Collagen III (Anti-Collagen Type III )  抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)

Plate count skim milk agar平板計數脫脂乳瓊脂人滑膜細胞cDNA3-基苯Collagen III (Anti--Collagen Type III )  Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)