公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究，作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹：

細胞名稱  大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞；RBL-2H3
形態特性: 成纖維細胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: RBL-2H3是1978年國立牙科研究所的免疫學實驗室從(cong) Wistar大鼠保持腫瘤狀態的嗜堿性細胞中分離和出來的嗜堿性白血病細胞株。這些細胞具有高親(qin) 和力的IgE受體(ti) 。通過集聚這些受體(ti) 或與(yu) 鈣離子載體(ti) 協同作用可以激活它們(men) 分泌組胺及其他遞質。這株細胞廣泛地用於(yu) 研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細胞是研究FcERI結構的模型。它們(men) 廣泛地用於(yu) 研究細胞分泌的不同方麵，包括細胞內(nei) 鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長，但在某些批號中FcERI集

培養(yang) 條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(you) 質熱滅活胎牛血清，15%

傳(chuan) 代方法: 消化3-5分鍾。1:2。3天內(nei) 可長滿。

傳(chuan) 代情況: PN5

凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS

支原體(ti) 檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ （-20 ℃30 分鍾*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ，而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃，並經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養(yang) 皿，但不宜過大，以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告：
一、分離與(yu) 培養(yang) ：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置，重複此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸，接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37℃ ，5％CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ；
5、差速貼壁1h後，吸出培養(yang) 基，按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yang) 基，用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次，每次10min，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS衝(chong) 洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的小鼠小膠質細胞；BV2-tdT DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Kocuria kristinae (Kloos et al.) Stackebran ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標記的人肺癌細胞；A549-Luc2-tdT-2 McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人胃癌細胞；MGC803-tdT DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Homo sapiens, human細胞名稱: 綠色熒光蛋白標記的人肺癌細胞；A549-EGFP McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

Xenorhabdus poinarii (Akhurst) Akhurst and ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人胃癌細胞；MGC803-mCherry DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Salmonella enterica subsp.enterica (e ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人鼻咽癌細胞；E2Z-tdT RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Homo sapiens, human細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人鼻咽癌細胞；E2Z-mCherry RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

frozen細胞名稱: 綠色熒光蛋白標記的人鼻咽癌細胞；E2Z-EGFP RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標記的人鼻咽癌細胞；E2Z-Luc2-tdT RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人骨肉瘤細胞；HOS-mCherry MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS；1%NEAA

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人骨肉瘤細胞；HOS-tdT MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS；1%NEAA

Staphylococcus xylosus Schleifer and Kloos細胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標記的人骨肉瘤細胞；HOS-Luc2-tdT MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS；1%NEAA

freeze-dried細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人非小細胞肺癌細胞；NCI-H1299-tdT RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Blastocystis hominis Brumpt細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的人非小細胞肺癌細胞；NCI-H1299-mCherry RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Streptococcus pyogenes Rosenbach細胞名稱: 綠色熒光蛋白標記的人非小細胞肺癌細胞；NCI-H1299-EGFP RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Phellinus igniarius (Fries) Quelet細胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標記的人非小細胞肺癌細胞；NCI-H1299-Luc2-tdT-2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞；RBL-2H3人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒TrxRELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人肥大細胞類(MCT)ELISA試劑盒TrxRELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人白細胞分化抗原14(CDl4)ELISA試劑盒TrxRELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人幹擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒Try-ⅡELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人γ幹擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒trypsinELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人肌細胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒TSELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒TSGFELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。

人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒TSGFELISAKit產(chan) 品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次，以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yang) 液，吹打下細胞，即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉澱細胞，盡量去除細胞消化液後，加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞，即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。