公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
大腸癌肝轉移細胞;CJF | 貼壁生長 | EY-X63970 |
細胞名稱 大腸癌肝轉移細胞;CJF
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yang) 條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳(chuan) 代方法: 1:3傳(chuan) 代,3-4天傳(chuan) 1次
傳(chuan) 代情況: C2
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
UDP-葡萄糖-3-O-類黃糖苷轉移酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSFlavonoids glycosyl transferase
半胱氨合成酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSaminothiopropionic acid synase
4-香豆連接酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)3%FBS4-coumarate coenzyme A ligase
細胞分裂素氧化酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS;0.01mg/mlInsulincytokinin oxidase
UDP-葡萄糖糖蛋白糖基轉移酶1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSUDP-Glucose Glycoprotein Glucosyltransferase 1
酪胺羥肉桂基轉移酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBStyramine hydroxycinnamoyl transferase
甲單加氧酶檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;8ng/mlrHuGM-csf;10%CO2Methane monooxygenase
甲基輔酶M還原酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;10mMHepes+1mM丙銅鈉MCR
葡聚糖水合二激酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長;部分細胞貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;4mMglutamineglucan-water dikinase
6-脫氧長春花甾檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS6-deoxoCS
外切葡聚糖酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁/懸浮生長培養(yang) 條件: Grace'sInsectMedium(GIMw/oBSA,FCS,WholeEggUltrafiltrate)10%FBSexoglucanase
蛋白質二硫鍵異構酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,並可懸浮生長培養(yang) 條件: F12K10%FBSprotein disulfide isomerase
類鈣調磷酶B蛋白檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;4mMglutamine;6-8ng/mlGM-CSFCalcineurin B-Like
纖維素合成酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: L15:LeibovitzMedium10%FBScellulose synthase
可溶性果膠檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSsoluble pectin
KORRIGAN酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長,有1%~2%的細胞可輕微貼壁。培養(yang) 條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;5-7u/mlEpo
端粒酶逆轉錄酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yang) 條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBStelomerase reverse transcriptase
大腸癌肝轉移細胞;CJF五味子丙素61301-33-5英文名:Schisandrin C
英文別名:Schizandrin C; Wuweizisu C
CAS登錄號:61301-33-5
分子式:C22H24O6
分子量:384.42
分子結構:
外觀:無色片狀晶體(ti)
規格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用於(yu) 含量測定/鑒定/藥理實驗等
提取來源:木蘭(lan) 科植物五味子[Schisandra chinensis (Turcz.)Baill.]的種子、莖等植物
溶解性:溶於(yu) 、、等。
熔點:122~123℃
旋光度:-54.9°(c1.0,),-31.4°(c0.587,)
藥理藥效:有抗病、抗癌、消炎等活性。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。