產(chan) 品主要成分

BEBM kit培養(yang) 基  (Lonza/Clonetics，CC-3170)

備注：培養(yang) 基包含（A+B）

A： BEBM 基礎培養(yang) 基         500ML

保存條件：2-8℃

B:  細胞生長添加劑            一套（包含下列試劑）

● BPE, 2.0 ml ● Hydrocortisone, 0.5 ml    ● hEGF, 0.5 ml

● Epinephrine, 0.5ml  ● Insulin,0.5 ml      ● Transferrin, 0.5 ml

● Triiodothyronine, 0.5 ml ● Retinoic Acid, 0.5 ml ● GA, 0.5ml

保存條件         ：-20℃

運輸和保存

放置於(yu) 含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸（儲(chu) 存條件2-8℃ 避光儲(chu) 存）產(chan) 品保質期12個(ge) 月。

僅(jin) 限科研用。

培養(yang) 體(ti) 係中的一些組分是對人體(ti) 健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yang) 體(ti) 係的液體(ti) 和有培養(yang) 體(ti) 係的液體(ti) 殘留的容器內(nei) 部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水衝(chong) 洗即可。

以下實驗方案介紹了培養(yang) 細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體(ti) 細胞的產(chan) 品說明書(shu) 。

1.配製凍存培養(yang) 基，於(yu) 2°C至8°C下儲(chu) 存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yang) 基取決(jue) 於(yu) 所用細胞係。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳(chuan) 代時所用方法輕柔地使細胞從(cong) 組織培養(yang) 容器上脫離下來。用該細胞所需培養(yang) 基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數器、細胞計數儀(yi) 按照台盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀(yi) 測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yang) 基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鍾。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉澱。

注：離心速度和時間取決(jue) 於(yu) 細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yang) 基重新懸浮細胞沉澱，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若幹凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。

7.使用可控製降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鍾大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然後將凍存盒置於(yu) -80°C條件下過夜。

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，並可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為(wei) 控製

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際進行人為(wei) 的控製，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為(wei) 條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處於(yu) 嚴(yan) 格控製之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yang) 一定代數後，所得到的細胞係則可以達到均一性而屬於(yu) 同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nei) 容便於(yu) 觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀(yi) 器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的範圍比較廣泛

應用的學科領域較為(wei) 寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳(chuan) 學、分子生物學等；

適用的對象範圍廣，從(cong) 低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重複性好的、生物學性狀相似的實驗對象。