商品詳情：
乳腺位於(yu) 皮下淺筋膜的淺層與(yu) 深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內(nei) 形成條索狀的小葉間隔，一端連於(yu) 胸肌筋膜，另一端連於(yu) 皮膚，將乳腺腺體(ti) 固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數可以重複經曆生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結締組織對乳房起固定作用，而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的。起支持作用和固定乳房位置的纖維結締組織稱為(wei) 乳房懸韌帶或Coopers韌帶。淺筋膜深層位於(yu) 乳腺的深麵，與(yu) 胸大肌筋膜淺層之間有疏鬆組織相連，稱乳房後間隙。它可使乳房既相對固定，又能在胸壁上有一定的移動性。
1) 細胞來源於(yu) 手術切除的乳腺癌組織。
2) 細胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為(wei) 陽性。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌。
4) 細胞生長方式：成纖維樣細胞，貼壁培養(yang) 。
商品屬性：
產(chan) 品名稱 | 人乳腺癌成纖維細胞永生化 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6566 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁培養(yang) | 細胞形態 | 成纖維樣細胞， |
細胞係培養(yang) 步驟：
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇：
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後，在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中（其中胎牛血清約為(wei) 10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，製成細胞懸液，接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展，為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本。
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇：
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後，在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中（其中胎牛血清約為(wei) 10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，製成細胞懸液，接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展，為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本
公司正在出售的產(chan) 品：
小鼠腸神經脊幹細胞 | NCI-H865 [H865]小細胞肺癌 |
兔晶狀體(ti) 上皮細胞 | KP4-3胰腺癌 |
兔角膜內(nei) 皮細胞 | Panc 10.05胰腺導管腺癌 |
兔鞏膜上皮細胞 | NCI-H157-Luc熒光素酶標記的人非小細胞 |
兔結膜成纖維細胞 | SW1353-Luc熒光素酶標記的人軟骨肉瘤細胞 |
兔結膜上皮細胞 | 抗AChEAE-2-Luc熒光素酶標記的小鼠雜交瘤細胞 |
兔脈絡膜微血管內(nei) 皮細胞 | LIM1863直腸癌 |
兔鞏膜成纖維細胞 | CM-LEE中國倉(cang) 鼠卵巢細胞 |
兔視網膜微血管周細胞 | SNG-Mzi宮癌 |
兔牙周膜成纖維細胞 | HRMC腎小球係膜細胞 |
兔牙周膜幹細胞 | Bel-7404肝癌細胞 |
兔牙髓幹細胞 | HME4黑色素瘤細胞 |
兔口腔黏膜上皮細胞 | 9L-E前列腺癌細胞 |
兔舌表皮細胞 | HCT-8/LUCSTR人結腸癌細胞帶熒光素酶 |
兔鼓膜上皮幹細胞 | 兔原代zi宮成纖維細胞 |
細胞接收後的處理：
1）人乳腺癌成纖維細胞永生化收到細胞後，75%酒精瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yang) 箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會(hui) 因振動脫落和脫落後成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yang) 瓶中灌液培養(yang) 基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yang) 瓶中）,加入新配製的培養(yang) 基6-8mL，放到細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳(chuan) 代處理。傳(chuan) 代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。 收到細胞後次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1：2傳(chuan) 代 。
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yang) 基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
