商品詳情：
細胞別稱：143B ；人骨肉瘤細胞
種屬來源：人
年齡性別：
組織來源：骨
生長特性：貼壁生長
細胞形態：混合型，成纖維與(yu) 上皮樣
背景簡介：143B細胞胸苷激酶陰性(TK-)。這是一個(ge) 人骨肉瘤細胞係
生物安全等級：1
細胞規格：1×106cells/T25培養(yang) 瓶或者1mL凍存管包裝
支原體(ti) 檢測：無
基因表達情況：
保藏機構：
培養(yang) 基：90% DMEM+10% FBS+PS
培養(yang) 條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲(chu) 存
商品屬性：
產(chan) 品名稱 | 143B人骨肉瘤細胞 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6283 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細胞形態 | 混合型，成纖維與(yu) 上皮樣 |
細胞係培養(yang) 步驟：
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇：
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後，在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中（其中胎牛血清約為(wei) 10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，製成細胞懸液，接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展，為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本。
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇：
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後，在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中（其中胎牛血清約為(wei) 10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，製成細胞懸液，接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展，為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本
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細胞接收後的處理：
1）143B人骨肉瘤細胞收到細胞後，75%酒精瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yang) 箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會(hui) 因振動脫落和脫落後成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yang) 瓶中灌液培養(yang) 基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yang) 瓶中）,加入新配製的培養(yang) 基6-8mL，放到細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳(chuan) 代處理。傳(chuan) 代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。 收到細胞後次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1：2傳(chuan) 代 。
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yang) 基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
