商品詳情：
滑膜是關(guan) 節囊的內(nei) 層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏鬆結締組織組成。關(guan) 節腔內(nei) 的所有結構，除關(guan) 節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關(guan) 節腔的肌腱、韌帶等均全部為(wei) 滑膜所包裹。滑膜分泌滑液，在關(guan) 節活動中起重要作用。正常滑膜分為(wei) 兩(liang) 層，即薄的細胞層(內(nei) 腔層)和血管層(內(nei) 膜下層)，是血管豐(feng) 富的關(guan) 節囊內(nei) 膜，貼附於(yu) 非關(guan) 節麵部分，覆蓋於(yu) 關(guan) 節囊內(nei) 的骨麵上，不在軟骨麵上，此部分稱為(wei) 邊緣區或“裸區"。滑膜呈粉紅色，光滑發亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，內(nei) 含膠原性纖維。滑膜細胞有A、B兩(liang) 型。巨噬細胞樣A型細胞，表麵有絲(si) 狀偽(wei) 足、漿膜內(nei) 陷、囊泡、線粒體(ti) 、溶酶體(ti) 、胞漿纖維和高爾基體(ti) ，具有吞噬功能；B型成纖維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內(nei) 質網結構，是介導 RA 關(guan) 節破壞的主要細胞。
1）細胞來源於(yu) 手術取得的患風濕性關(guan) 節炎病人的關(guan) 節滑膜組織。
2) 細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為(wei) 陽性。
3) 經鑒定細胞純度高於(yu) 90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：成纖維樣細胞，貼壁培養(yang) 。
商品屬性：
產(chan) 品名稱 | 人風濕性關(guan) 節滑膜成纖維細胞永生化 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6564 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁培養(yang) | 細胞形態 | 成纖維樣細胞， |
細胞係培養(yang) 步驟：
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇：
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後，在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中（其中胎牛血清約為(wei) 10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，製成細胞懸液，接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展，為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本。
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇：
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後，在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中（其中胎牛血清約為(wei) 10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，製成細胞懸液，接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yang) 基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化，轉移至離心管後500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yang) 基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展，為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本
公司正在出售的產(chan) 品：
小鼠腎上腺皮質細胞 | F12基礎培養(yang) 基 |
兔椎體(ti) 終板軟骨細胞 | 澳洲胎牛血清 |
兔T淋巴細胞 | 胰蛋白 |
兔單核細胞 | 嘌呤黴素 |
兔骨骼肌微血管內(nei) 皮細胞 | 膠原酶I |
兔耳軟骨細胞 | 重組大鼠血管內(nei) 皮生長因子 VEGF 164 |
兔骨膜幹細胞 | 人白細胞介素IL-6 |
兔脾源性內(nei) 皮祖細胞 | 支原體(ti) 預防試劑，2000 × |
兔淋巴管內(nei) 皮細胞 | 激光共聚焦培養(yang) 皿 |
兔肌腱細胞 | hEM15A培養(yang) 基 |
兔椎體(ti) 終板軟骨幹細胞 | Ana-1小鼠巨噬細胞 |
兔骨髓基質幹細胞 | G422小鼠腦神經膠質母細胞 |
兔脂肪血管基質細胞 | L929小鼠成纖維細胞 |
兔股骨頭微血管內(nei) 皮細胞 | NG108-15小鼠神經細胞瘤與(yu) 大鼠神經膠質瘤之融合細胞 |
兔B淋巴細胞 | STC-1小鼠小腸細胞 |
細胞接收後的處理：
1）人風濕性關(guan) 節滑膜成纖維細胞永生化收到細胞後，75%酒精瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yang) 箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會(hui) 因振動脫落和脫落後成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yang) 瓶中灌液培養(yang) 基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yang) 瓶中）,加入新配製的培養(yang) 基6-8mL，放到細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳(chuan) 代處理。傳(chuan) 代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。 收到細胞後次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1：2傳(chuan) 代 。
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yang) 基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
