商品詳情:
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yang) 方案A(默認)
生長培養(yang) 基:
MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
培養(yang) 條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳(chuan) 代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
注意事項 該細胞貼壁鬆散,操作時請盡量輕柔;換液時需預熱培養(yang) 基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為(wei) 正常現象,請按照收貨注意事項處理。
參考資料(來源文獻)
背景描述 293 [HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞,293 [HEK-293]細胞包含並表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出,293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(ce) 端和右側(ce) 端的DNA,但是現在明確了隻存在其左側(ce) 端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現,Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(ti) (19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為(wei) 人類腺病毒載體(ti) 擴增的宿主,可表達異常的玻連蛋白的細胞表麵受體(ti) ,由整合素β1亞(ya) 單位和玻連蛋白受體(ti) α-v亞(ya) 單位組成。
年齡(性別) 胎兒(er)
組織來源 腎;以腺病毒5DNA進行轉化
細胞類型 轉化細胞係
生物安全等級 BSL-2
倍增時間 ~24-30 hours
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受體(ti) 表達情況 vitronectin
保藏機構 ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602

商品屬性:
產(chan) 品名稱 | HEK-293A人胚腎細胞 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6173 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞係培養(yang) 步驟:
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇:
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後,在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中(其中胎牛血清約為(wei) 10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,製成細胞懸液,接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展,為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本。
細胞係培養(yang) 的步驟主要包括細胞複蘇、細胞傳(chuan) 代和細胞凍存。
細胞複蘇:
將凍存細胞從(cong) 液氮中取出後,在37℃水浴鍋內(nei) 不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yang) 基中(其中胎牛血清約為(wei) 10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,製成細胞懸液,接種於(yu) 培養(yang) 皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳(chuan) 代:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數,然後按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
細胞凍存:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yang) 基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yang) 箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yang) 基終止消化,轉移至離心管後500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yang) 基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體(ti) 外環境中得到有效的維持和擴展,為(wei) 科學研究提供了大量的細胞樣本
公司正在出售的產(chan) 品:
大鼠視網膜前體(ti) 細胞 | 大鼠脈絡叢(cong) 上皮細胞 |
NCCIT (人畸胎癌細胞) (STR鑒定正確) | 人原代尾椎腫瘤細胞 |
TOV-112D (人上皮性卵巢癌細胞) (STR鑒定正確) | 人原代視網膜微血管內(nei) 皮細胞 |
NCI-H1755(人肺癌細胞)(STR鑒定正確) | 大鼠原代肝內(nei) 膽管上皮細胞 |
LS513 (人結直腸癌細胞) (STR鑒定正確) | 兔原代胃平滑肌細胞 |
TPC-1 (人甲狀腺癌細胞) (STR鑒定正確) | 小鼠原代DC細胞 |
FTC-133 (人濾泡狀甲狀腺癌細胞) | 小鼠原代棕色脂肪幹細胞 |
SBC-2(人小細胞肺癌細胞) | 小鼠原代小腸平滑肌細胞 |
CX-1(人結腸癌細胞)(STR鑒定正確) | 大鼠原代輸尿管成纖維細胞 |
HTh-7 (人甲狀腺癌細胞) (STR鑒定正確) | 人原代腦微血管平滑肌細胞 |
C643 (人甲狀腺癌細胞) (STR鑒定正確) | 兔原代膀胱基質成纖維細胞 |
KTC-1 (人甲狀腺癌細胞) (STR鑒定正確) | 小鼠原代宮頸上皮細胞 |
ACT-1 (人甲狀腺癌細胞) | 人原代Ⅱ型肺泡上皮細胞 |
HLE (人肝癌細胞(未分化)) | 大鼠原代結膜囊成纖維細胞 |
A2058 (人皮膚癌細胞) (STR鑒定正確) | 大鼠原代頸靜脈內(nei) 皮細胞 |
細胞接收後的處理:
1)HEK-293A人胚腎細胞收到細胞後,75%酒精瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h,若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染,請拍照後及時聯係我們(men) 。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存,作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yang) 箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會(hui) 因振動脫落和脫落後成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yang) 瓶中灌液培養(yang) 基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yang) 瓶中),加入新配製的培養(yang) 基6-8mL,放到細胞培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳(chuan) 代處理。傳(chuan) 代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yang) 基(灌液培養(yang) 基)不能再用來培養(yang) 細胞,請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。 收到細胞後次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1:2傳(chuan) 代 。
一.培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yang) 基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yang) 條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。